CARY BLAIR TERPĖ: PAGRINDIMAS, PARUOŠIMAS IR PANAUDOJIMAS - BIOLOGIJA - 2025

Vidutinis Cary Bleras yra pusiau kietas agaro, naudojamas transporto ir išsaugojimo biologinių mėginių kurioje aptinkamos žarnyno patogenų, mikroorganizmų ir anaerobinis labilus. Kaip ir visos transporto priemonės, jo funkcija yra išlaikyti mėginį optimaliomis sąlygomis, kol jis bus kultivuojamas. Esantys patogeniniai mikroorganizmai, taip pat juos lydinti mikrobiota, turi išlikti gyvybingi, tačiau nedidinant jų populiacijos.

Cary Blair terpė yra Stuart Transport Medium sudėties pakeitimo rezultatas. Modifikacija buvo atlikta 1964 m. Ir ją sudarė pH reguliavimo sistemos (glicerofosfato) pakeitimas fosfatuotu neorganiniu buferiu.

A. Culturette su Cary Blair terpe B. Išmatų kolekcionierius su Cary Blair terpe. Šaltinis: A. Video Meganhow, gaukite žaizdų kultūrą 2011 youtube.com B. Vartotojas: Mattes

Reformacija buvo būtina, nes jos kūrėjai suprato, kad glicerofosfatą po tam tikro laiko gali metabolizuoti kai kurios saprofitinės bakterijos. Jie dauginasi iš esančių patogenų.

Kiti pokyčiai buvo metileno mėlynojo pašalinimas, taip pat pH sureguliavimas šarmingumo atžvilgiu (pH 8,4). Visi šie pokyčiai pagerino transporto priemonių efektyvumą.

Iš pradžių „Cary Blair“ terpė buvo naudojama žarnyno patogenams, tokiems kaip Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae ir Campylobacter sp, palaikyti.

Tačiau vėliau buvo pastebėtas veiksmingumas išsaugant reiklių ir labilių patogenų, tokių kaip: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae ir kai kuriuos anaerobus, gyvybingumą.

Pagrindas

„Cary Blair“ terpėje yra natrio chlorido, natrio tioglikolato, dinatrio fosfato, kalcio chlorido ir agaro.

Natrio chloridas palaiko osmosinę terpės pusiausvyrą, dinatrio fosfatas ir kalcio chloridas subalansuoja pH. Natrio tioglikolatas savo ruožtu išlaiko mažą oksidacijos ir redukcijos potencialą, o nedidelė agaro dalis suteikia pusiau kietą konsistenciją.

„Cary Blair“ terpėje nėra maistinių medžiagų, nes transportavimo terpės funkcija yra išlaikyti mėginį nepakeitus jo drėgmės ir mikrobų apkrovos; tai yra, išvengiama mėginio dehidratacijos, išlaikant mikroorganizmų gyvybingumą ir kiekį.

Galiausiai šiek tiek šarminis pH apsaugo nuo mikroorganizmų mirties dėl rūgštingumo, ypač Vibrios yra labai jautrios rūgštims.

Paruošimas

„Cary Blair“ terpė yra prekyboje kaip specialus paruoštas naudoti prietaisas. Transporto sistemą dengia plastikinis „Peel Pack“ maišas. Jo viduje yra tamponas mėginiui paimti ir konteinerio vamzdelis Cary Blair pusiau kietai terpei.

Taip pat rinkoje yra komercinių namų, tiekiančių dehidratuotą terpę jos paruošimui laboratorijoje.

Norėdami tai padaryti, pasverkite 13,2 g dehidratuotos terpės ir ištirpinkite ją viename litre distiliuoto vandens. Preparatą kaitinkite ir purtykite, kol jis visiškai ištirps. Paskirstykite terpę į užsukamus mėgintuvėlius (bakelitą).

Gaudykite mėgintuvėlius 15 minučių. Leiskite atvėsti ir palaikykite kambario temperatūroje iki naudojimo.

Neinokuliuotą Cary Blair terpę kambario temperatūroje galima optimaliai laikyti iki 18 mėnesių.

Terpės pH turi būti nustatytas iki 8,4 ± 0,2. Paruoštos terpės spalva yra smėlio spalvos, su tam tikru opalescencija.

Naudokite

Mėginių rūšis

„Cary Blair Medium“ naudojamas, kai išmatų mėginių, tiesiosios žarnos tamponų ir makšties tamponų negalima nedelsiant apdoroti.

Kai transporto priemonės nėra, mėginius galima laikyti -70 ° C temperatūroje.

Mėginių ėmimas

Tamponas yra įmirkytas mėginiu ir įpilamas į Cary Blair terpę, nepasiekiant dugno.

Mėginio identifikavimas

„Cary Blair“ terpė turi turėti etiketę, kurioje yra pagrindiniai duomenys, pavyzdžiui: paciento vardas ir pavardė, mėginio identifikavimo numeris, mėginio paėmimo šaltinis, gydantis gydytojas, paėmimo data ir laikas. mėginys, numatoma diagnozė, gydymas antibiotikais.

Perkėlimas

Išmatų mėginiai sandariai uždengiami ir gabenami kambario temperatūroje. Kadangi makšties mėginiams, ieškantiems anaerobinių mikroorganizmų, rekomenduojama juos gabenti 4 ° C temperatūroje.

Visais atvejais rekomenduojamas perkėlimo laikas yra 4–6 valandos, daugiausiai - 24 valandos.

Jei įtariama, kad išmatų mėginiuose yra Campylobacter jejuni, ir jie negali būti apdoroti per 24 valandas, rekomenduojama laikyti Cary Blair terpėje 4 ° C temperatūroje.

„Cary Blair“ transporto priemonių tyrimai

Keli tyrimai parodė, kad Cary Blair terpė gali išlikti gyvybinga Shigella ir Salmonella genties mikroorganizmams enteropatogeniškiems net 49 dienas po mėginio paėmimo.

Vibrio cholerae, kitas svarbus žarnyno patogenas, gali išgyventi 22 dienas, o Yersinia pestis (sukėlėjas - buboninis ir pneumoninis maras) gali pasveikti po 75 dienų.

Nepaisant įrodyto šių mikroorganizmų atsigavimo patvarumo, rekomenduojama, kad paimti mėginiai Cary Blair terpėje į laboratoriją būtų kuo greitesni.

Panašiai, kai mėginys pasiekia laboratoriją, jis turi būti nedelsiant pasėtas atitinkamose terpėse.

Kita vertus, Cary Blair terpė, ne tik naudinga fakultatyviems mikroorganizmams pernešti, taip pat rekomenduojama imti mėginius, kuriuose yra anaerobinių patogenų.

Šia prasme DeMarco ir kt., 2017 m. Atliko tyrimą pavadinimu: Makšties mikroorganizmų išgyvenimas trijose komerciškai prieinamose transporto sistemose.

Jie parodė, kad „Cary Blair“ transportavimo terpė yra geriausia transportavimo terpė makšties anaerobiniams mikroorganizmams išsaugoti ir atkurti. Be to, jie parodė, kad didžiausia regeneravimo norma buvo pasiekta, kai perdavimo temperatūra buvo 4 ° C.

Todėl daroma išvada, kad makšties tamponų (anaerobinių mikroorganizmų) gabenimo temperatūra turėtų būti 4 ° C. Išmatų mėginiams, ieškantiems fakultatyvinių mikroorganizmų, ideali temperatūra yra kambario temperatūra.

QA

Norint įvertinti „Cary Blair“ pernešimo terpės kokybės padermes, žinomas kaip Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae ir Campylobacter sp.

Terpė inokuliuojama pasirinktu kamienu ir 24 valandas palaikoma kambario temperatūroje. Tada jie sėjami į atitinkamas terpes. Visais atvejais tikimasi patenkinamo aptariamo mikroorganizmo atsistatymo.

Nuorodos

1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN ir kt. Makšties mikroorganizmų išgyvenimas trijose komercinėse transporto sistemose. Anaerobe. 2017; 45: 44–49.
2. „Wasfy M“, „Oyofo B“, „Elgindy A“, „Churilla A.“ Išmatų mėginių laikymo terpių palyginimas. J Clin mikrobiolis. devyniolika devyniasdešimt penki; 33 (8): 2176–2178.
3. Dan M, Richardson J, Miliotis MD, Koornhof HJ. Išmatų pavyzdžių laikymo terpių ir užšalimo sąlygų palyginimas. J Med mikrobiolis. 1989; 28 (2): 151–4.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologinė diagnostika. 5-asis leidimas Redakcija Panamericana SA Argentina.
5. „Forbes B“, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey ir Scotto mikrobiologinė diagnozė. 12 red. Redakcija Panamericana SA Argentina.
6. „Conda Pronadisa“ laboratorijos. Pusė Cary Blair. Galima rasti: condalab.com
7. „Metrix“ laboratorija. Cary Blair. Galima rasti: metrixlab.mx