„STUART“ TERPĖ: PAGRINDAS, PARUOŠIMAS IR PANAUDOJIMAS - BIOLOGIJA

Vidutinio Stuartas yra pusiau kieta agaro arba sultinio be maistinių medžiagų, naudojamų biologinių mėginių transportu. Jos tikslas - išlaikyti mėginyje esančias padermes tam tikrą laiką gyvybingas, tačiau nedidinant mikrobų populiacijos.

Jį sukūrė „Moffet“, „Young“ ir „Stuart“ 1948 m., Vėliau modifikavo „Toshach“ ir „Patsula“. Jį sudaro natrio glicerofosfatas, natrio tioglikolatas, kalcio chloridas ir agaro agaras. Pastarosios yra pusiau kietoje terpėje, o skysčio jos nėra. Kai kurios laboratorijos prideda metileno mėlynojo.

„Culturette“ su „Stuart“ transportavimu. Šaltinis: Autorius: CDC / Dr. Gilda Jones, mandagumas: visuomenės sveikatos vaizdų biblioteka

Paprastai jie naudojami tada, kai neįmanoma iš karto sėti mėginio. Tokiu atveju mėginys dedamas į transportavimo terpę, o perkeliamas į laboratoriją, kurioje bus apdorota kultūra.

Tokiu būdu garantuojama, kad esantys mikroorganizmai išliks gyvi, kol bus pasėti atitinkamose terpėse.

Iš pradžių jis buvo naudojamas šlaplės ar makšties mėginiams gabenti, jei įtariama, kad yra Neisseria gonorrhoeae. Vėliau jie suprato, kad jo naudingumas gali būti platesnis.

Stuart terpė pasirodė esanti labai veiksminga saugant labilius ir nuobodžius mikroorganizmus, tokius kaip Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis. Be kitų neerzinančių mikroorganizmų, tokių kaip Enterobakterijos.

Stuarto terpė iš esmės apsaugo nuo pavyzdžio išsausėjimo, palaiko osmosinę pusiausvyrą ir išsaugo mikroorganizmus, kurių pH yra idealus. Kita vertus, strategiškai šioje terpėje nėra maistinių medžiagų, taip užkertant kelią mikroorganizmams daugintis.

Rinkoje yra specialių pavyzdžių gabenimo įtaisų, kuriuose yra ši ar kita transporto priemonė, vadinama „tte kulta “. Juos taip pat galima paruošti laboratorijoje.

Pagrindas

„Stuart“ transporto rūšies tikslas yra išlaikyti mėginius kuo arčiau jų pirminės būklės, kol jie nebus apdorojami.

Natrio glicerofosfatas ir kalcio chloridas yra buferinė sistema, veikianti palaikant pH ir osmoliariškumą.

Tuo tarpu natrio tioglikolilatas veikia kaip reduktorius, o jei yra agaro, jis suteikia pusiau kietą konsistenciją, kad atidėtų terpės deguonį. Galiausiai metileno mėlynasis yra oksidacijos indikatorius, tai yra, jis nustato deguonies buvimą.

Pusiau kieta terpė su redokso indikatoriumi yra ideali mėginių gabenimui ten, kur įtariama, kad yra anaerobinių bakterijų.

Transporto priemonės charakteristikos

„Stuart“ terpė, kaip ir visos transporto priemonės, atitinka tam tikras savybes, įskaitant:

- Išlaiko gyvybingus mikrobinius štamus nepadaugindamas.

-Nėra maistinių medžiagų; Jo junginiais siekiama išlaikyti mėginį hidratuotą esant tinkamam pH ir osmoliariškumui.

- slopina kai kurių subtilių mikroorganizmų, tokių kaip pneumokokas, autolizaciją.

-Naudojimas yra laikinas, jis neturėtų būti per ilgas.

Paruošimas

Pusiau kieta „Stuart“ terpė su redokso indikatoriumi

Namų paruošimas

Ingridientai

Natrio glicerofosfatas 10 gr

Natrio tioglikolatas 1,0 gr

Kalcio chloridas 0,1 gr

Metileno mėlyna 0,002 gr

Agaras-agaras 3 gr

Distiliuotas vanduo 1 L

Sumaišykite komponentus ir kaitinkite, kol visiškai ištirps. Supilkite į mėgintuvėlius ar specialius tamponus. Jie įpilami į autoklavą ir 15 minučių sterilizuojami 121ºC temperatūroje. Leiskite mėgintuvėliams atvėsti vertikalioje padėtyje (bloko formos). Laikyti kambario temperatūroje.

Paruošimas naudojant komercinę terpę

1 litre distiliuoto vandens pasveriama 14,1 g terpės. Dažnai kaitinkite, kol visiškai ištirps, jis gali būti virinamas. Likusi procedūros dalis, kaip jau aprašyta.

Dehidratuota terpė yra kreminės spalvos, o paruoštas paviršius turi būti mėlynas. Taip yra dėl metileno mėlynos spalvos.

Terpės pH turi būti nustatytas iki 7,4 ± 0,2

Skystas modifikuotas „Stuart Medium“ (naminis)

Ingridientai

Natrio glicerofosfatas 10 gr

Natrio tioglikolatas 1 gr

Kalcio chlorido dihidratas 0,1 gr

Distiliuotas vanduo 1000 ml

Jis turi tuos pačius ingredientus kaip pusiau kietas, tačiau jame nėra agaro ar metileno mėlynojo. Tokiu atveju komponentai sumaišomi nekaitinant ir 0,5 ml paskirstoma 16 x 125 mm tūbelėse su užsukamais dangteliais.

Jis sterilizuojamas autoklave 121 ° C temperatūroje 10 minučių. Mėginiams imti turėtų būti naudojami dakrono tamponai, jei mėginys skirtas PGR, arba spindulys, jei jis skirtas kultūrai.

Vamzdeliai laikomi kambario temperatūroje.

Programos

Komerciniu požiūriu yra specialių pavyzdžių transportavimo įtaisų, vadinamų „tte kulta “; Šis prietaisas yra pailgas plonas vamzdelis, kurio viduje yra tamponas, o gale yra segmentas, kuriame yra pusiau kieta arba skysta Stuart terpė.

Prietaisas atidaromas ir mėginys imamas su tamponu. Tada jis įleidžiamas atgal į mėgintuvėlį, kol tampono galiukas įkišamas į pusiau kietą transportavimo terpę; Kai kurie atsineša poliuretano kempinę, įmirkytą skysta „Stuart“ terpe, su kuria mėginys išsaugomas, kai jis šlapias.

Jei įtariama, kad yra subtilių mikroorganizmų, mėginiui imti turėtų būti naudojami medvilniniai tamponai su medžio anglimi.

Mėginiai, kuriuos galima paimti su tamponais ar tamponais ir pernešti į šią terpę, yra ryklės eksudatas, tiesiosios žarnos tamponai ir įvairios sekrecijos, tarp jų: makšties, šlaplės, žaizdos, akių, otos ir abscesas.

Perkeliant mėginį į transportavimo terpę į laboratoriją, reikia vengti terpės veikimo ekstremaliomis aplinkos sąlygomis (per šalta ar per karšta). Taip pat reikėtų vengti staigių atmosferos slėgio pokyčių.

Laikas, per kurį terpė gali išlaikyti mikroorganizmą gyvybingą, priklausys nuo nagrinėjamo padermės. Pavyzdžiui, Neisserias ir Haemophilus genties mikroorganizmams jie gali išlikti gyvybingi iki 24 valandų, tačiau tokios padermės kaip Salmonella ar Shigella gali išsilaikyti dienomis ir net savaitėmis.

Jei manoma, kad mėginio apdorojimas gali užtrukti ilgiau nei 4 dienas, geriau mėginį užšaldyti -70 ° C temperatūroje.

Mėginio identifikavimas transporto priemonėje

Paruoštoje transporto priemonėje arba komercinėje kultūroje turi būti etiketė, kurioje bus pateikta ši informacija:

Paciento vardas ir pavardė: išvengiama painiavos.

Identifikacijos numeris: patogu palaikyti užsakymą darbe.

Mėginių paėmimo šaltinis: padeda bakteriologui pasirinkti tinkamą terpę.

Lankantis gydytojas: Kartais tai būtina dėl galimų konsultacijų.

Mėginio paėmimo data ir laikas: reikia, kad mėginys būtų priimtas arba atmestas atsižvelgiant į laiką, praėjusį nuo mėginio paėmimo iki gavimo laboratorijoje.

Kita informacija, kurią būtų labai naudinga pridėti, yra:

Įtariama diagnozė : vadovaujantis pridedama specialių terpių pagal įtariamą diagnozę.

Gydymas antibiotikais: naudinga įtraukti į antibiotikų schemą.

Visa ši informacija yra gyvybiškai svarbi užtikrinant tinkamą mėginių apdorojimą.

QA

Norint įvertinti Stuart terpės veikimą, žinomus kamienus galima pasėti ir laikyti 25 ° C temperatūroje, tokius kaip: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae.

Visais atvejais tikimasi susigrąžinti minėtą mikroorganizmą, saugomą 24 valandas.

Kita vertus, gali būti naudojami ir kiti štamai, tokie kaip: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 ir Escherichia coli ATCC.

Visais atvejais numatomas gausus pasveikimas iki 96 valandų.

Apribojimai

Kai kurie tyrimai patvirtina, kad Stuarto terpėje esantį glicerofosfatą gali metabolizuoti kai kurios koliformos, tarp kitų gramneigiamų bakterijų, todėl šioje terpėje daugintis.

Ši rizika padidėja, kuo ilgiau atidėtas mėginio apdorojimas. Taip pat tam turi įtakos Stuarto terpės veikimas aukšta temperatūra transportuojant.

Nuorodos

"Transporto terpė (mikrobiologija)." Vikipedija, nemokama enciklopedija. 2018 m. Balandžio 13 d., 10:36 UTC. 2019 m. Balandžio 1 d. Prieinama: es.wikipedia.org
„Microkit“ laboratorijos: kultūrinės terpės. „Stuart“ transportavimas. Galima rasti: Galima rasti: Medioscultivo.com
„LabLisan“. Stuarto transporto priemonės. Galima rasti: lablinsan.cl
Mokslinis MDM. Stuart mikrobiologinės transportavimo terpės pranašumai. Galima rasti: mdmc Scientifica.com
„Metrix“ laboratorijos. Stuartas. 2017.Atsiejama: metrixlab.mx
„Forbes B“, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey ir Scotto mikrobiologinė diagnozė. 12 red. Redakcija Panamericana SA Argentina.
Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologinė diagnostika. 5-asis leidimas Redakcija Panamericana SA Argentina.

„STUART“ TERPĖ: PAGRINDAS, PARUOŠIMAS IR PANAUDOJIMAS - BIOLOGIJA - 2025