KONGO RAUDONA: CHARAKTERISTIKOS, PARUOŠIMAS IR PRITAIKYMAS - BIOLOGIJA - 2025

Kongo raudona yra azo dažiklio, baltymų suformuotų gaunamas sujungiant diazonio druską ir aktyvų aromatinį žiedą. Ši medžiaga geba absorbuoti elektromagnetinę spinduliuotę regimajame spektre, todėl jos spalva yra ryški.

Tai neigiamai įkrauta. Todėl jis turi afinitetą teigiamai įkrautiems ląstelių komponentams, tokiems kaip tam tikros baltyminės medžiagos. Jo spalva kinta priklausomai nuo pH. Šia prasme, jei terpė yra rūgštinė (<nei pH 3), spalva yra ryškiai mėlyna. Tarp pH3 –5,2 yra fuksija (posūkio zona), o esant> 5,2 pH spalva yra ryškiai raudona.

Dehidratuotas Kongo raudonasis ir Kongo raudonasis koloidinis tirpalas. Šaltinis: Pixinio.com ir Wikipedia.com

Tai labai universali medžiaga, nes ji gali būti naudojama daug kartų. Jis buvo naudojamas kaip dažiklis tekstilės pramonėje, taip pat ląstelėms ir audiniams.

Taip pat sudaryti kultūrines terpes, kurios matuoja fermentinį poveikį, kaip pH rodiklį, kaip kontrolinę medžiagą vertinant tinkamą spektrofotometrų veikimą, tiriant biofilmų formavimąsi arba diagnozuojant amiloidus.

Panašiai, jis leido atskirti bakterinius ir grybelinius serotipus, identifikuodamas specifines jų sienelių struktūras (lipopolisaharidai).

Charakteristikos Kongo raudona

Šią medžiagą 1868 metais atrado Bėtgeris. Tai yra diazonio darinys, kurį sudaro benzidino bis-diazoinė rūgštis su naftiono rūgštimi. Kongo raudonoji molekulė matuoja 21 Armstrongą, o molekulinė masė yra maždaug 8000 g / mol.

Kongo raudonasis pasižymi tuo, kad tirpsta vandenyje, o dar labiau organiniuose tirpikliuose, tokiuose kaip etanolis, ir sudaro koloidinį tirpalą.

Jis turi afinitetą celiuliozei, amiloidiniam audiniui ir teigiamai įkrautiems ląsteliniams komponentams.

Paruošimas

Kongo raudonasis yra paruoštas skirtingomis koncentracijomis, atsižvelgiant į naudojamą metodą. Kongo raudonąją daugumą dažniausiai naudoja 1%, 2%, 0,1%.

Pavyzdžiui, norint paruošti 2% Kongo raudonos spalvos, reikėtų pasverti 2 g dehidratuoto maisto dažiklio ir įpilti 100 ml distiliuoto vandens. Tada jis laikomas gintaro butelyje.

Programos

Kaip dažiklis tekstilės pramonėje

Kurį laiką jis buvo plačiai naudojamas tekstilės pramonėje dėl jo fiksavimo ant medvilnės, tačiau šiuo metu jis nebenaudojamas, nes yra kancerogeniškas, taip pat dėl ​​to, kad spalva nėra stabili, todėl spalvos pasikeičia dėl trinties.

Bioplėvelės formavimosi pajėgumo nustatymas

Įrodyta, kad mikroorganizmų biofilmų formavimo gebėjimas yra virulentiškumo faktorius.

Šia prasme Kongo raudonasis dažiklis yra naudojamas kaip metodas bioplėvelės susidarymui nustatyti. Kongo raudonasis jungiasi su biopolime esančiais egzopolisaharidais. Tačiau, palyginti su kitais metodais, jis yra mažiausiai rekomenduojamas dėl didelių klaidingų negatyvų.

Šiuo metodu naudojamas Kongo raudonasis agaras, kurį sudaro kraujo agaras kaip bazė, gliukozė (10 g / l) ir Kongo raudonasis dažiklis (0,4 g / l). Vertintinos padermės sėjamos į terpę ir inkubuojamos 24 valandas 37 ° C temperatūroje, o vėliau inkubuojamos 48 valandas kambario temperatūroje.

Teigiamas testas yra įrodytas, jei pastebimos kristalinės juodos spalvos ir sausos išvaizdos kolonijos.

Spektrofotometrų kokybės kontrolė

Norint įvertinti, ar absorbcija ar operacijos matavimo įranga atitinka fotometrinius parametrus, nustatytus tarptautiniuose teisės aktuose, galima nustatyti paprastą metodą, norint nustatyti, ar įranga skleidžia rezultatus priimtinumo diapazonuose.

Vienas iš vertinimo metodų yra Kongo raudonojo, pagrįsto izosbestiniu tašku, naudojimas.

Izosbestinis taškas yra bangos ilgis, kurio metu Kongo raudonoji spinduliuotė absorbuoja vienodai, nepriklausomai nuo pH, koncentracijos ir temperatūros. Sugerties vertė yra fiksuota ir gali būti naudojama kaip atskaitos taškas.

Teorinis Kongo raudonojo izosbestinio taško dydis yra 541 nm. Jei gauta vertė skiriasi, žinoma, kad įranga turi bangos ilgio dreifo problemų, todėl ją turi patikrinti specializuotas technikas.

Kultūrinės terpės paruošimas

Ortiz et al. Apibūdinkite auginimo terpę, paruoštą su Kongo raudonaisiais dažais ir karboksimetilceliulioze, vadinamą CMC agaru, kad būtų galima aptikti celiulito mikrobų padermes; y., celiulazės gamintojai (endogliukonai, egzogliukanazės ir ß-gliukozidazė).

Ši terpė turi intensyvų spalvą. Spalva išsisklaidys veikiant fermentui endogliukanazei, kuris ardo karboksimetilceliuliozės struktūrą. Tai rodo teigiamą reakciją.

Klampumo ir absorbcijos sumažėjimas leidžia įvertinti fermento aktyvumą. Pavyzdžiui, Streptomyces sp.

Mikroorganizmų identifikavimas

Kongo raudonasis turi afinitetą tam tikrų kamienų polisacharidinėms struktūroms, tokiu būdu nustatant šiuos mikroorganizmus. Tarp jų yra Escherichia coli ir Shigella flexneri.

Kongo raudonojo agaro lėkštelės taip pat naudojamos būdingoms kolonijoms gauti, pavyzdžiui, Azospirillum sp, kuri, be kita ko, suteikia raudonai raudonas kolonijas.

Ląstelių ir audinių dėmė

Vienas iš labiausiai paplitusių Kongo raudonosios spalvos būdų yra jo naudingumas diagnozuojant amiloidozę. Ši keista liga susideda iš nenormalių baltymų tarpląstelinio kaupimosi įvairiuose organuose. Šis nenormalus baltymas gaminamas kaulų čiulpuose ir yra vadinamas amiloidu.

Kongo raudonasis turi didelį afinitetą šiai medžiagai. Ši savybė buvo naudojama norint parodyti jos buvimą histologiniuose audinių pjūviuose. „Congo Red“ šiam tikslui naudojamas kartu su hematoksilinu / eozinu.

Amiloidinio audinio ir Kongo raudonojo jungtis atsiranda per nepolinius vandenilio ryšius, tarp karboksilo grupių ir aminogrupės. Amiloidinis baltymas suteikia karboksilo grupes (COOH), o Kongas - raudoną amino grupę.

Amiloidinis audinys yra spalvotas įvairiais atspalviais: nuo rožinės iki ryškiai raudonos spalvos, matant jį šviesos mikroskopu. Mikroskopuose, turinčiuose dvigubai poliarizuotą šviesą, šie preparatai stebimi pasižymint patognomoniniu obuolių-žaliųjų dvipusio lūžio pojūčiu.

Tai yra, jie turi dichroizmą, nes amiloido skaidulos yra anizotropinės. Šis pastebėjimas patvirtina diagnozę.

Audinių dažymas Kongo raudona spalva yra suderinamas su kitomis diagnostikos metodikomis, tokiomis kaip imunocitocheminiai metodai, ir gali būti atnaujintas.

Kaip pH rodiklis

Pasipriešinimo pH pokyčiams savybę naudoja technika, vadinama chromoendoskopija.

Ši technika naudoja dažiklius ir pH rodiklius, leidžiančius aptikti tam tikras patologijas. Tarp jų yra Kongo raudonojo, kuris gali atskleisti ankstyvojo vėžio židinius skrandžio gleivinėje, panaudojimas kaip rūgštingumo žymeklis.

Metodas pagrįstas tuo, kad Kongo raudonasis esant rūgščiam pH yra juodas. Todėl įdėjus Kongo raudonojo tirpalo ant skrandžio gleivinės, biopsijai imti imamos tos vietos, kuriose yra blyškumas, ty ten, kur nėra rūgšties. Tai rodo vėžinio fokusavimo buvimą ar parietalinių ląstelių praradimą.

Nuorodos

1. „Kongo Raudonoji“. Vikipedija, nemokama enciklopedija. 2019 m. Gegužės 8 d., 12:13 UTC. 2019 m. Gegužės 16 d., 04:08, es.wikipedia.org.
2. Ortiz M, Uribe D. Naujas endogliukanazės aktyvumo kiekybinio įvertinimo metodas, pagrįstas celiuliozės ir Kongo raudonuoju kompleksu. Orinoquia. 2011 m. Birželis; 15 (1): 7-15. Galima gauti iš: scielo.org.
3. Peña J, Uffo O. Biofilmų gamyba Staphylococcus aureus genotipuose, išskirtuose iš galvijų mastito Kuboje. Atgal Salud Anim. . 2013 gruodis; 35 (3): 189–196. Galima rasti: scielo.s
4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G et al. Odos sisteminės amiloidozės apraiškos kaip diagnostinis raktas: klinikinis atvejis. Medicinos gydytojas Čilė. 2012 balandis; 140 (4): 499-502. Galima rasti: „scielo“.
5. Duymovich C, Acheme R, Sesini S, Mazziotta D. Spektrofotometrai ir fotokolorimetrai Praktinio atnaujinimo vadovas. „Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana 2005“, 39 (rugsėjis – gruodis): Galima rasti: redalyc.org
6. Marín J, Díaz J ir Solís J. Chromoendoskopija Helicobacter pylori infekcijoje: ar tai reakcijos laikas? „Rev Esp Enferm Dig 2012“; 104 (1): 1–3
7. Fieser L, Fieser M. 1985. Organinė chemija. Redakcijos revertas. Barselona, ​​Ispanija. Galima rasti adresu books.google.co.ve
8. Murillo M. Histologinis audinių dažymo būdas. Gvadalacharos universitetas, Meksika. Galima rasti adresu: academia.edu
9. Paillié M. Actinobakterijų, išskirtų iš baltojo dobilo (Trifolium repens) rizosferos dirvožemio, celiulolitinio, ligninolitinio ir amilolitinio aktyvumo nustatymas., 2012. Pontificia Universidad Javeriana mokslų fakultetas Bogotos DC pramoninė mikrobiologija Galima rasti: repository.javeriana.edu.co
10. Cárdenas, D, Garrido M, Bonilla R ir Baldani V. Azospirillum sp. ant Gvinėjos žolės (Panicum maximum Jacq.) iš Cezario slėnio. Ganyklos ir pašarai, 2010; 33 (3): 1-8 Galima rasti „scielo“.