NEFELOMETRIJA: KAS JĄ SUDARO IR PROGRAMOS - CHEMIJA - 2025

Nephelometry apima matavimą spinduliuotės, kurią sukelia dalelių (iš tirpalo arba suspensijos) ir matavimo pasklindžių spinduliuotės galią kampu į krentančio spindulių kryptimi.

Kai į pakabinamą dalelę trenkiasi šviesos pluoštas, ten yra dalis šviesos, kuri atsispindi, kita dalis sugeriama, kita deformuota, o likusi dalis perduodama. Štai kodėl, kai šviesa patenka į skaidrią terpę, kurioje yra kietų dalelių suspensija, suspensija atrodo drumsta.

Kas yra nefelometrija?

Spinduliuotės sklaida dalelėse tirpale

Tuo metu, kai šviesos pluoštas trenkiasi į suspenduotos medžiagos daleles, pluošto sklidimo kryptis keičia jo kryptį. Šis poveikis priklauso nuo:

1.Dalyvės matmenys (dydis ir forma).

2. Suspensijos charakteristikos (koncentracija).

3.Šviesos bangos ilgis ir intensyvumas.

4.Incidentinis šviesos atstumas.

5. Aptikimo kampas.

6. Terpės lūžio rodiklis.

Nefelometras

Nefelometras yra prietaisas, naudojamas matuoti suspenduotas daleles skystame mėginyje ar dujose. Taigi, fotoelementas, pastatytas 90 ° kampu šviesos šaltinio atžvilgiu, nustato suspensijoje esančių dalelių radiaciją.

Lygiai taip pat dalelių atspindima šviesa link fotoelemento priklauso nuo dalelių tankio. 1 diagramoje pateikiami pagrindiniai komponentai, sudarantys nefelometrą:

1 pav. Pagrindiniai nefelometro komponentai.

Į.

Nefelometrijoje labai svarbu turėti didelį šviesos srautą spinduliuotės šaltinį. Yra įvairių tipų, pradedant ksenono ir gyvsidabrio garų lempomis, volframo halogeninėmis lempomis, lazerio spinduliuote.

B.

Ši sistema yra tarp spinduliuotės šaltinio ir kiuvetės, taigi tokiu būdu kiuvetėje bus išvengta skirtingo bangos ilgio radiacijos, palyginti su norima.

Priešingu atveju tirpalo fluorescencinės reakcijos arba kaitinantis poveikis galėtų sukelti matavimų nuokrypius.

C.

Paprastai tai yra prizminė arba cilindrinė talpykla, kurios dydis gali būti skirtingas. Tai tiriamas sprendimas.

D.

Detektorius yra tam tikru atstumu (paprastai labai arti kiuvetės) ir yra atsakingas už radiacijos, kurią išsklaidė suspensijoje esančios dalelės, nustatymą.

IR.

Paprastai tai yra elektroninė mašina, kuri priima, konvertuoja ir apdoroja duomenis, kurie šiuo atveju yra iš atlikto tyrimo gauti matavimai.

Nukrypimai

Kiekvienam matavimui taikoma procentinė paklaida, kurią daugiausia sudaro:

Užterštos kiuvetės: kiuvetėse bet koks tiriamojo tirpalo išorėje esantis agentas, esantis kiuvetės viduje ar išorėje, sumažina spinduliuojančią šviesą pakeliui į detektorių (sugedusios kiuvetės, dulkės, prilipusios prie kiuvetės sienelių).

Trukdžiai : mikrobinis teršalas ar drumstumas išsklaido spinduliavimo energiją, padidindamas dispersijos intensyvumą.

Fluorescenciniai junginiai : tai yra tie junginiai, kurie, sužadinami atsitiktinės spinduliuotės, sukelia klaidingus ir didelio išsklaidymo tankio rodmenis.

Reagentų laikymas : netinkama sistemos temperatūra gali sukelti nepageidaujamas tyrimo sąlygas ir sukelti drumstus ar nusodintus reagentus.

Elektros energijos svyravimai : kad atsitiktinė radiacija netaptų klaidos šaltiniu, tolygiai spinduliuotei rekomenduojama naudoti įtampos stabilizatorius.

Metrologinės charakteristikos

Kadangi aptiktos radiacijos spinduliuotės galia yra tiesiogiai proporcinga dalelių masės koncentracijai, nephelometriniai tyrimai teoriškai turi didesnį metrologinį jautrumą nei kiti panašūs metodai (pavyzdžiui, turbidimetrija).

Be to, ši technika reikalauja praskiestų tirpalų. Tai leidžia sumažinti absorbcijos ir atspindžio reiškinius.

Programos

Nefelometriniai tyrimai užima labai svarbią vietą klinikinėse laboratorijose. Taikymo sritis apima imunoglobulinų ir ūminės fazės baltymų nustatymą, papildymą ir krešėjimą.

Imuninio komplekso nustatymas

Kai biologiniame mėginyje yra dominantis antigenas, jis sumaišomas (buferiniame tirpale) su antikūnu, kad susidarytų imuninis kompleksas.

Nefelometrija matuoja šviesos kiekį, išsklaidytą dėl antigeno-antikūno reakcijos (Ag-Ac), ir tokiu būdu nustatomi imuniniai kompleksai.

Šį tyrimą galima atlikti dviem būdais:

Galinio taško nephelometrija:

Šis metodas gali būti naudojamas galutinio taško analizei, kai tiriamo biologinio mėginio antikūnas inkubuojamas dvidešimt keturias valandas.

Ag-Ac kompleksas matuojamas nefelometru, o išsklaidytos šviesos kiekis lyginamas su tuo pačiu matavimu, atliktu prieš komplekso susidarymą.

Kinetinė nephelometrija

Šiuo metodu nuolat stebimas komplekso susidarymo greitis. Reakcijos greitis priklauso nuo antigeno koncentracijos mėginyje. Matavimai imami kaip laiko funkcija, todėl pirmasis matavimas atliekamas „nulio“ (t = 0) metu.

Kinetinė nefelometrija yra plačiausiai naudojama technika, nes tyrimas gali būti atliktas per 1 valandą, palyginti su ilgu galutinio taško metodo laikotarpiu. Dispersijos santykis matuojamas iškart pridėjus reagentą.

Todėl tol, kol reagentas yra pastovus, esamas antigeno kiekis laikomas tiesiogiai proporcingu pokyčio greičiui.

Kitos programos

Nefelometrija paprastai naudojama vandens cheminės kokybės analizei, siekiant nustatyti skaidrumą ir kontroliuoti jo valymo procesus.

Jis taip pat naudojamas oro taršai matuoti, kai dalelių koncentracija nustatoma pagal dispersiją, kurią jos sukuria kritimo metu.

Nuorodos

1. Britannica, E. (nd). Nefelometrija ir drumstumas. Atgauta iš britannica.com
2. Al-Saleh, M. (nd). Turbidimetrija ir nehelometrija. Gauta iš pdfs.semanticscholar.org
3. „Bangs Laboratories, Inc.“ (nd). Atgauta iš technochemical.com
4. Morais, IV (2006). Turbidimetrinė ir nehelometrinė srauto analizė. Gauta iš repository.ucp.p
5. Sasson, S. (2014). Nefelometrijos ir drumstumo principai. Atkurta iš notesonimmunology.files.wordpress.com
6. Stanley, J. (2002). Imunologijos ir serologijos pagrindai. Albany, NY: „Thompson“ mokymasis. Gauta iš books.google.co.ve
7. Vikipedija. (sf). Nefelometrija (vaistas). Atkurta iš en.wikipedia.org