KRYŽMINIAI TESTAI: KAM JIE SKIRTI, TECHNIKA, PAGRINDIMAS, FAZĖS - VAISTAS - 2025

Crossmatch yra laboratorinių tyrimų skaičius yra atliekami siekiant nustatyti, ar kraujo produktai iš donoro (daugiausia sveiki kraujo ir supakuoti kamuolinis) yra suderinama su gavėjo kraujyje.

Tai yra papildomas ABO suderinamumo ir Rh faktoriaus testas. Kryžminimo priežastis ta, kad kartais du asmenys (donoras-recipientas) gali turėti tą pačią ABO ir Rh grupę, tačiau vis tiek jų kraujas nesuderinamas.

Šaltinis: unsplash.com

Tokį nesuderinamumą lemia antikūnų prieš raudonųjų kraujo kūnelių baltymus, žinomus kaip nedideli antigenai, serija. Šie antigenai nėra reguliariai tikrinami, nes jie yra skirti kraujo grupei (ABO) ir Rh faktoriui.

Taip yra todėl, kad nedideli antigenai yra daug retesni ir turi skirtingą išraišką kiekviename individe, todėl jų sugrupuoti į kategorijas yra praktiškai neįmanoma, kaip tai daroma su grupės ir Rh faktoriais.

Vietoj to, siekiant nustatyti antigeno ir antikūnų reakcijas, donoro raudonieji kraujo kūneliai sumaišomi su paciento serumu (pagrindinis atitikimo testas), o paciento raudonieji kraujo kūneliai - su donoro serumu (mažosios atitikties testas).

Kai paciento ar donoro serume yra antikūnų prieš nedidelius antigenus, testas yra teigiamas, todėl daugeliu atvejų to kraujo vieneto negalima perpilti.

ABO grupė

Norėdami visiškai suprasti, kas yra kryžminės reakcijos, pirmiausia turite žinoti kraujo grupių pagrindus.

Šia prasme svarbiausia žinoti, kad kraują galima suskirstyti į keturias grupes: A, B, AB ir O.

Kiekviena iš šių grupių išreiškia tam tikrą baltymą (antigeną) raudonųjų kraujo kūnelių paviršiuje, kurį skirtingos grupės potencialaus receptoriaus antikūnai atpažįsta kaip svetimą elementą.

Ryškiausias dalykas, susijęs su antigeno ir antikūnų reakcijomis, lyginant kraują, yra tas, kad norint, kad antikūnai egzistuotų, nebūtina atlikti išankstinio antigeno poveikio. Tai vadinama natūraliais antikūnais.

Natūralūs antikūnai

Paprastai norint, kad antikūnai egzistuotų asmens kūne, būtina, kad balti kraujo kūneliai būtų anksčiau paveikti antigenu.

Tai reiškia, kad per pirmąjį kontaktą tarp svetimo antigeno ir organizmo nėra jokių antikūnų, nes jie susidaro vėliau, po pirminio kontakto. Todėl imuninei sistemai neįmanoma turėti antikūnų prieš, pavyzdžiui, tam tikrą virusą, jei jis anksčiau jo nebuvo paveikęs.

Vienintelė išimtis iš aukščiau išvardytų yra anti-AB antigenai. Tokiais atvejais asmuo turi antikūnų prieš antigeną, kurių jų raudonieji kraujo kūneliai neturi, net jei jie niekada neturėjo kontaktų su kito žmogaus raudonaisiais kraujo kūneliais. Tai vadinama natūraliais antikūnais.

Su kraujo grupe susiję antigenai ir antikūnai

Kraujo grupės nustatomos ABO sistemos atveju pagal specifinių antigenų (A arba B) buvimą raudonųjų kraujo kūnelių membranoje ir, priešingai, antikūnus prieš trūkstamą antigeną ant eritrocitų membranos.

Taigi asmuo, turintis A kraujo grupę, savo raudonųjų kraujo kūnelių paviršiuje ekspresuoja antigeną A, tuo tarpu serume yra anti-B antikūnų.

B grupės pacientams, priešingai, randamas B antigenas, o antikūnai yra anti-A.

Tačiau pacientai, sergantys AB krauju, turi tiek A, tiek B. Antigenų, todėl antikūnų nėra, nes taip sunaikinus to žmogaus raudonuosius kraujo kūnelius.

O grupėje, kur eritrocitų membranoje nėra nė vieno iš dviejų antigenų (nei A, nei B), atvirkščiai, o serume yra anti-A ir anti-B antikūnų.

ABO grupės nesuderinamumas

Iš to, kas išdėstyta, galima lengvai nustatyti ABO kraujo grupių suderinamumą, nes žinant eritrocitų membranos antigeną, serume esantys antikūnai yra automatiškai žinomi. Taigi, kad:

- A kraujas yra suderinamas su A ir O grupe.

- B kraujo grupė yra suderinama su B ir O krauju.

- Žmonės iš O grupės gali gauti tik O kraują (nes jie turi anti-A ir anti-B antikūnus), nors jų kraują visos problemos priima be problemų, nes jame nėra antigenų.

- Pagaliau. tie, kurie turi AB kraujo grupę, gali gauti kraujo iš visų kitų grupių (A, B, O ir, žinoma, AB), nes jie neturi antikūnų prieš kurį nors iš antigenų. Tačiau tik AB grupės žmonės gali gauti AB kraują, nes visos kitos grupės turi antikūnus, kurie sunaikins šias raudonuosius kraujo kūnelius.

Mažieji antigenai

Kaip ir ABO grupėse, eritrocitų paviršiuje galima rasti daugybę baltymų, kurie veikia kaip antigenai taip pat, kaip ir ABO grupės antigenai.

Tačiau šių antigenų nėra visiems žmonėms. Jų derinys yra nevienalytis, o prasiskverbimas (baltymų ekspresijos lygis) yra įvairus, todėl neįmanoma suskirstyti į tokias grupes, kaip kad egzistuoja ABO ir Rh. Štai iš kur jis kilęs iš „nedidelių antigenų“, dar vadinamų „mažo dažnio antigenais“.

Nors jie nėra dažni, gali būti natūralių antikūnų prieš nedidelius antigenus. Tarp jų labiausiai paplitę yra Lewis, MNSs, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb ir Kidd. Visi jie atsakingi už labai sunkias hemolizines ir po transfuzijos reakcijas.

Be to, gali būti jautrinimas prieš nedidelius antigenus dėl ankstesnio kontakto arba su minėtais antigeniniais baltymais dėl ankstesnio transfuzijos, arba dėl kryžminio imuniteto.

Kryžminis imunitetas

Sakoma, kad yra kryžminis imunitetas, kai du antigenai iš dviejų skirtingų šaltinių (pavyzdžiui, raudonųjų kraujo kūnelių ir bakterijų) yra labai panašūs, kad antikūnai prieš vieną iš šių antigeninių baltymų taip pat reaguoja su kitu, nes yra beveik identiški .

Norėdami tai geriau suprasti, paimkite ankstesnį hipotetinį pavyzdį (antigenai iš raudonųjų kraujo kūnelių ir bakterijų). Nei vienu atveju nėra natūralių antikūnų, tačiau jei žmogus yra veikiamas bakterijų, jie sukurs antikūnus prieš ją.

Tokie antikūnai vėliau sureaguos į raudonąją kraujo kūnelę, jei jos antigenai yra labai panašūs į bakterijų, kurios sukėlė antikūnus, susidarymą.

Tokiu atveju raudonieji kraujo kūneliai, turintys tą specifinį antigeninį baltymą, negali būti atiduoti asmeniui, kuris turi antikūnus, nes tai būtų atmetimas. Čia slypi kryžminių reakcijų svarba.

Kas yra kryžminimas?

Kadangi neįmanoma suskirstyti skirtingų asmenų kraujo pagal mažuosius antigenus, vienintelis būdas sužinoti, ar vieno žmogaus kraujyje yra antikūnų prieš kito žmogaus raudonųjų kraujo kūnelių nedidelius antigenus, yra kryžminimas. .

Tais atvejais, kai yra antikūnų, suveikia hemolizė arba agliutinacijos reakcija, todėl daroma išvada, kad reakcija buvo teigiama; y., yra antikūnų prieš nedidelius antigenus (nors tiksliai nežinoma, kuris iš jų). Priešingu atveju testas yra neigiamas.

Pagrindas

Kryžminiai atitikimai yra pagrįsti antigeno ir antikūno reakcija. Todėl su jais galima nustatyti, ar recipiento serume yra antikūnų prieš donoro eritrocitų antigenus (arba atvirkščiai), sukeliančius antigeno ir antikūno reakciją.

Jei nėra antikūnų, reakcija nevyksta ir testas yra neigiamas. Priešingai, jei reakcija yra teigiama (tyrimo metu vyksta hemolizė ar agliutinacija), galima daryti išvadą, kad antikūnų yra.

Šiuo atžvilgiu svarbu atkreipti dėmesį, kad donoro ir recipiento serume gali būti antikūnų prieš raudonuosius kraujo kūnelius. Štai kodėl yra dviejų rūšių kryžminės reakcijos.

Kryžminių reakcijų tipai

Antikūnai prieš donoro eritrocitus gali būti paciento serume; bet taip pat gali atsirasti priešingai, tai yra antikūnai donoro serume prieš paciento raudonuosius kraujo kūnelius.

Štai kodėl yra du kryžminio atitikimo tipai:

- Pagrindinis atitikimas.

- Mažas kryžminis atitikimas.

Abu tipai kraujo banke atliekami reguliariai prieš perpilant kraujo produktus, nes jei kuris nors iš tyrimų yra teigiamas, yra didelė kraujo perpylimo reakcijų, kurios gali kelti pavojų paciento gyvybei, rizika.

Pagrindinis kryžminis atitikimas

Šis tyrimas nustato, ar recipiento serume nėra antikūnų prieš donoro raudonuosius kraujo kūnelius.

Tokiu atveju kraujo produktų skirti negalima, nes didelis antikūnų kiekis, esantis paciento plazmoje, labai greitai sunaikina donoro raudonuosius kraujo kūnelius, sukeldamas katastrofiškas gavėjo kūno reakcijas. Šios reakcijos yra tokios sunkios, kad gali kelti pavojų gyvybei.

Mažas kryžminis atitikimas

Šiuo atveju nustatoma, ar donoro serume nėra antikūnų prieš recipiento raudonuosius kraujo kūnelius.

Jei taip, antikūnai pradės sunaikinti recipiento eritrocitus. Tačiau atsižvelgiant į tai, kad antikūnų kiekis yra ribotas, reakcija nėra tokia intensyvi; nors vis tiek pavojinga.

Fazės

Pagrindinis ir mažasis kryžminiai sutapimai yra suskirstyti į tris fazes:

- fiziologinis tirpalas.

- terminis arba inkubavimas.

- Kumbos.

Pirmajame etape raudonieji kraujo kūneliai ir serumas sumaišomi fiziologiniame tirpale. Po to pridedamas albuminas ir mėginys inkubuojamas 30 minučių 37 ° C temperatūroje, kad galiausiai būtų galima pereiti į pomidorų fazę.

Technika

Kryžminio atitikimo metodas yra gana paprastas, nes jis apima donoro raudonųjų kraujo kūnelių pridėjimą į paciento serumą (pagrindinis kryžminis atitikimas), taip pat recipiento eritrocitų įtraukimą į donoro serumą (nedidelis kryžminis atitikimas).

Norint per gana trumpą laiką sukelti antigeno ir antikūno reakciją, reikia laikytis standartizuotų etapų. Šie žingsniai supaprastinta tvarka apibendrinami žemiau.

Svarbu atkreipti dėmesį į tai, kad kitame skyriuje aprašomas pagrindinis suderinamumo testas, nors mažesnio suderinamumo bandymo etapai yra tokie patys, tačiau keičiantis raudonųjų kraujo kūnelių kilme ir serumu.

Druskos fazė

- Į mėgintuvėlį įlašinkite 2 lašus serumo iš recipiento (iš donoro, jei tai nedidelis kryžminis sutapimas).

- Paimkite iš donoro raudonųjų kraujo kūnelių mėginį (iš recipiento, jei jis yra nedidelis kryžminis kampas).

- Nuplaukite ir centrifuguokite raudonuosius kraujo kūnelius.

- Sumaišykite tirpale nuo 3% iki 5%.

- Įlašinkite lašą šio tirpalo į mėgintuvėlį, kuriame yra recipiento serumas.

- Švelniai sumaišykite.

- Centrifuga.

- Perskaitykite rezultatą ekrano lempoje.

Šiluminė fazė

- Į mėgintuvėlį, kuriame buvo baigta druskos fazė, įlašinkite 2 lašus 22% albumino.

- Inkubuokite 30 minučių 37 ° C temperatūroje.

- Centrifuguokite 15 sekundžių.

- Perskaitykite rezultatą ekrano lempoje.

Kombų fazė

- Paimkite ląsteles iš mėgintuvėlio ir nuplaukite jas druskos tirpalu.

- Pašalinkite supernatantą.

- Įlašinkite du lašus Coombso reagento.

- Švelniai sumaišykite.

- Centrifuguokite 15–30 sekundžių.

- Resuspenduokite ląsteles ir įvertinkite, ar žiūrėjimo lempoje nėra agliutinacijos ar hemolizės.

Jei kurioje nors iš fazių yra agliutinacija ar hemolizė, rezultatas laikomas teigiamu.

Nuorodos

1. Hall, TC, Pattenden, C., Hollobone, C., Pollard, C., & Dennison, AR (2013). Kraujo perpylimo politika pasirenkamojoje bendrojoje chirurgijoje: kaip optimizuoti kryžminio santykio ir perpylimo santykį. Transfuzinė medicina ir hemoterapija, 40 (1), 27–31.
2. Silvergleid, AJ, Wells, RF, Hafleigh, EB, Korn, G., Kellner, JJ, & Grumet, FC (1978). Suderinamumo testas naudojant 51 chromu pažymėtus raudonuosius kraujo kūnelius pacientams, kuriems nustatytas kryžminis suderinamumas. Transfuzija, 18 (1), 8–14.
3. Kulkarni, N., Ali, M., Haray, PN, Joseph, A., & Masoud, A. (2006). Elektroninė suderinimo sistema. Ar nebereikia įprastinių priešoperacinių kraujo atitikčių kolorektalinei rezekcijai? Endoskopija, 38 (11), „Poster_50“.
4. Heal, J. M., Blumbergas, N., ir Masel, D. (1987). Kryžminio atitikimo, HLA ir ABO atitikimo vertinimas trombocitų transfuzijos metu pacientams, kurie yra refrakteriniai. Kraujas, 70 (1), 23–30.
5. Arslanas, Ö. (2006). Elektroninis kryžminimas. Transfuzinės medicinos apžvalgos, 20 (1), 75–79.
6. Wu, KK, Hoak, JC, Koepke, JA, ir Thompson, JS (1977). Suderinamų trombocitų donorų atranka: numatomas trijų kryžminio suderinimo metodų įvertinimas. Transfuzija, 17 (6), 638-643.
7. Schonewille, H., Zijl, AMV ir Wijermans, PW (2003). Antikūnų prieš RBC antigenus svarba atliekant visišką ir sutrumpintą kryžminį atitikimą. Transfuzija, 43 (7), 939-944.