BENEDIKTO REAGENTAS: KAM JIS SKIRTAS, KOMPONENTAI, PARUOŠIMAS - CHEMIJA - 2025

Į Benedikto 'S reagentas yra mėlyna vario tirpalas, kuris yra naudojamas aptikti redukuojančių cukrų buvimą: aldehidų, alfa-hidroksi ketonų ir hemiketals. Jį sukūrė Stanley R. Benedictas (1884–1936).

Alfa-hidroksi-ketono cukroms būdinga tai, kad šalia ketono yra hidroksilo grupė. Tuo tarpu hemiketalis yra junginys, gaunamas pridedant alkoholio prie aldehido ar ketono. Benedikto reagentas beatodairiškai reaguoja į visus šiuos redukuojančius cukrų.

Mėgintuvėlių spalvos po to, kai pridedamas Benedikto reagentas, leidžia mums pusiau kiekybiškai žinoti, kiek redukuojančių cukrų yra ištirpę. Šaltinis: Thebiologyprimer

Benedikto metodas grindžiamas redukuojančiu cukraus poveikiu mėlynos spalvos Cu ²⁺ , kuris paverčia jį Cu ⁺ . Cu ⁺ sudaro plytų raudonos spalvos vario oksido nuosėdas. Tačiau priklausomai nuo cukraus koncentracijos atsiranda spalvų spektras (vaizdas viršutinėje dalyje).

Atminkite, kad jei Benedikto reagentas įpilamas į mėgintuvėlį nesumažinant cukraus (0%), jo melsva spalva nepakinta. Taigi, kai koncentracija yra didesnė kaip 4%, mėgintuvėlis nusidažo ruda spalva.

Istorija

Reagentą sukūrė amerikietis chemikas Stanley Rossiteris Benedictas, 1909 m. Paskelbęs savo mokslinį straipsnį A reagentas redukcinių cukrų nustatymui, žurnale J. Biol. Chem.

Be to, Lewis ir Benedict (1915) paskelbė redukuojančio cukraus kiekio kraujyje nustatymo metodą, kaip indikatorių naudodami pikratą; tačiau jis buvo nutrauktas dėl jo konkretumo trūkumo.

Benedikto reagentas labai panašus į Fehlingo. Jie skiriasi tuo, kad Benediktas naudoja citrato joną ir natrio karbonato druską; o Fehlingas naudoja tartrato joną ir natrio hidroksidą.

Benedikto testas yra kokybinis, tai yra, jis nustato tik redukuojančių cukrų buvimą. Tačiau Benedikto reagentas gali būti kiekybinis, jei jo tirpale yra kalio tiocianato, kuris sudaro baltas vario tiocianato nuosėdas, kurias galima titruoti naudojant gliukozės standartus.

Kam skirtas Benedikto reagentas?

Gliukozės aptikimas šlapime

Benedikto reagentas vis dar naudojamas aptikti gliukozės kiekį šlapime ir yra diabeto ligos požymis pacientui, kurio šlapimas yra tiriamas Benedikto tyrimu. Vis dėlto negalima atmesti galimybės, kad gliukozurija yra kitokia.

Pavyzdžiui, padidėjusi glikozurija randama tokiomis ligomis kaip: nėštumas, pirminė inkstų glikozurija, inkstų kanalėlių acidozė, pirminis ar antrinis Fanconi sindromas, hiperaldosteronizmas ir ūmus pankreatitas ar kasos vėžys.

Benedikto reagentas yra mėlynos spalvos dėl to, kad jame yra Cu ²⁺ , kuris redukuojančių cukrų dėka sumažinamas iki Cu ⁺ ; šiuo atveju gliukozė, sudarydama plytų raudonojo vario (I) oksido nuosėdas.

Tirpalo dažymas

Benedikto testo metu šlapimui taikomų nuosėdų spalva ir formavimas skiriasi priklausomai nuo redukuojančio cukraus koncentracijos. Jei gliukozės koncentracija šlapime yra mažesnė nei 500 mg / dL, tirpalas pasidaro žalias ir nuosėdos nesusidaro.

Gliukozės koncentracija šlapime 500–1000 mg / dL sukelia žalias nuosėdas Benedikto tyrime. Esant didesnei kaip 1 000–1 500 mg / dL koncentracijai, susidaro geltonos nuosėdos.

Jei gliukozės koncentracija yra 1500–2000 mg / dL, bus matomos oranžinės nuosėdos. Galiausiai, gliukozės koncentracija šlapime yra didesnė nei 2000 mg / dL, todėl susidarys plytos raudonos spalvos nuosėdos.

Tai rodo, kad Benedikto testas turi pusiau kiekybinį pobūdį, o rezultatas nurodomas kryžiais. Taigi, pavyzdžiui, žalių nuosėdų susidarymas atitinka kryžių (+); o plytų raudonos spalvos nuosėdų susidarymas atitinka keturis kryžius (++++).

Įvairių monosacharidų ir disacharidų aptikimas

Benedikto reagentas nustato redukuojančių cukrų, turinčių laisvą funkcinę grupę arba laisvą ketonų funkcinę grupę, buvimą kaip savo molekulinės struktūros dalį. Tai yra gliukozė, galaktozė, manozė ir fruktozė (monosacharidai), taip pat laktozė ir maltozė (disacharidai).

Sacharozė ir krakmolas nereaguoja su Benedikto reagentu, nes jie turi laisvas redukuojančias grupes. Be to, yra junginių, trukdančių atlikti Benedikto testą šlapime, suteikiant klaidingą pozityvumą; toks atvejis yra salicilatai, penicilinai, streptomicinas, levodopa, nalidikso rūgštis ir izoniazidas.

Šlapime yra chemikalų, kurie gali sumažinti Benedikto reakciją; pavyzdžiui: kreatininas, uratas ir askorbo rūgštis.

Komponentai

Benedikto reagento komponentai yra šie: vario sulfato pentahidratas, natrio karbonatas, trinatrio citratas ir distiliuotas vanduo.

Vario sulfato pentahidrato, CuSO ₄ · 5H ₂ O, sudėtyje yra Cu ²⁺ : tai junginys, kuris Benedikto reagentui suteikia mėlyną spalvą. Reduktoriai veikia Cu ²⁺ , todėl sumažėja iki Cu ⁺ ir susidaro plytos raudonos spalvos vario oksido nuosėdos (Cu ₂ O).

Natrio karbonatas sukuria šarminę terpę, reikalingą vario redukcijai. Natrio karbonatas reaguoja su vandeniu, sukurdamas natrio bikarbonatą ir hidroksilo joną, OH ^- atsakingą už terpės šarmingumą, reikalingą redukciniam procesui vykti.

Natrio citratas sudaro kompleksą su variu (II), kuris saugojimo metu neleidžia jam redukuotis iki Cu (I).

Naudojimo tvarka

Į 20 x 160 mm mėgintuvėlį įpilama 5 ml Benedikto reagento ir pridedama 8 lašai šlapimo. Mėgintuvėlis švelniai suplakamas ir 5-10 minučių dedamas į verdančio vandens indą.

Po šio laiko vamzdis pašalinamas iš karšto vandens vonios ir jo paviršius aušinamas tekančiu vandeniu, kad pagaliau būtų galima nuskaityti rezultatą, gautą atliekant Benedikto testą (spalvas).

Benedikto bandymo reakcija

Cu (II) sumažėjimą Benedikto testo metu galima suskaidyti taip:

RCHO + 2 Cu ²⁺ (komplekse) + 5 OH ^- => RCOO ^- + Cu ₂ O + 3 H ₂ O

RCHO = aldehidas; RCOO ^- = (karboksilato jonas); Cu ₂ O = vario oksidas, plytų raudonos spalvos nuosėdos.

Benedikto reagento paruošimas

Pasveriama 173 gramai natrio citrato ir 100 gramų natrio karbonato ir kartu ištirpinama 800 ml šilto distiliuoto vandens. Jei pastebima neištirpusių medžiagų pėdsakų, tirpalas turi būti filtruojamas.

Kita vertus, 17,3 g vario sulfato pentahidrato ištirpinama 100 ml distiliuoto vandens.

Po to du vandeniniai tirpalai švelniai sumaišomi ir tęsiamas nuolatinis maišymas, praskiedžiant distiliuotu vandeniu iki 1000 ml.

Nuorodos

1. Grahamas Solomonsas TW, Craigas B. Fryhle'as. (2011). Organinė chemija. Aminai. (10 ^-asis leidimas). „Wiley Plus“.
2. Clarkas J. (2015). Aldehidų ir ketonų oksidacija. Atgauta iš: chemguide.co.uk
3. Vikipedija. (2020). Benedikto reagentas. Atkurta iš: en.wikipedia.org
4. Redakcijos komanda. (2019 m. Sausio 9 d.). Benedikto testas: principas, reagento paruošimas, procedūra ir aiškinimas. Atkurta iš: laboratorijainfo.com
5. Daktaras Whitsonas. (sf). Benedikto reagentas: cukraus mažinimo testas. Atgauta iš: nku.edu