SAFRANINAS: SAVYBĖS, NAUDOJIMAS, BŪDAI, TOKSIŠKUMAS - CHEMIJA - 2025

Safranino yra meriquinoide dažų, pavadintas jo cheminę struktūrą, turinčio du BENZENOIDO žiedai ir 2 quinoid žiedų, pastaroji yra tie, kurie suteikia raudoną spalvą.

Jis taip pat vadinamas dimetil-safraninu arba baziniu raudonuoju 2, jo trumpa forma, nes jo mokslinis pavadinimas yra 3,7-diamino-2,8-dimetil-5-fenil-fenaziniumchloro-dimetil-safraninas, o cheminė formulė yra C ₂₀ H ₁₉ N ₄ Kl.

Cheminė safranino struktūra, rodanti benzenoidų ir chinoidų žiedus / vandeninis safranino tirpalas. Šaltinis: NEUROtiker redagavo magistrantūra. Marielsa Gil / LHcheM

Yra variantas, vadinamas trimetil-safraninu, tačiau reikšmingo skirtumo tarp šių dviejų medžiagų nėra.

Safraninas yra vienspalvis dažiklis ir, atsižvelgiant į cheminės formulės savybes, yra teigiamai įkrauta medžiaga. Todėl ji turi ryšį su neigiamai įkrautomis struktūromis. Šios struktūros bus nudažytos raudona spalva.

Ši savybė suteikia jam galimybę pritaikyti daugelį histologinių metodų dažant įvairias ląstelių struktūras - tiek eukariotinius, tiek prokariotinius organizmus.

Safraninas yra naudojamas kaip kontrastinis dažiklis svarbiuose ir gerai žinomuose įprasto naudojimo bakteriologijoje metoduose. Šie metodai yra: „Gram-Hucker“, „Schaeffer Fulton“ dažymas, skirtas sporoms, arba bakterinių kapsulių dažymas, be kita ko.

charakteristikos

Šafrano spalva (prieskonis, gautas iš Crocus sativus gėlės stigmų) buvo įkvėpimas pavadinti šį dažą. Iš termino šafranas kilęs safranino pavadinimas. Taip yra todėl, kad šafrano spalva yra labai panaši į dažus, kuriuos suteikia šis dažiklis.

Safraninas tiekiamas kaip kristalai arba milteliai, abu tirpūs vandenyje. Safranino dažai neturi kvapo. Dėmių struktūros raudonos. Struktūros, kurios traukia safranino dažus, vadinamos safranofilais.

Struktūriškai safraninas yra sudėtingas, jo galuose yra du benzenoidiniai žiedai, o centre yra du chinoido žiedai, kuriuose randamas N ⁺ katijonas . Konstrukcijos centre yra sistema, atsakinga už spalvos suteikimą. Dėl šios savybės šis dažiklis klasifikuojamas II kategorijoje.

Naudokite

Safraninas naudojamas dažyti įvairias struktūras. Ypač išryškinamos Kulchitsky ląstelės, esančios virškinimo trakte, dar vadinamos enterochromaffin ląstelėmis.

Tai geba dažyti mikroorganizmus, priklausančius Rickettsiaceae šeimai. Taip pat jis naudojamas įvairiuose metoduose, tokiuose kaip Kosterio metodas, modifikuotas Brucella genties bakterijoms dažyti.

Kita vertus, safraninas naudojamas Schaeffer Fulton sporų dažymo technikoje ir Gram-Hucker dažyme. Abiejuose metoduose safraninas veikia kaip kontrastinis dažiklis.

Pirmajame sporos įgauna malachito žalią spalvą, o likusios struktūros yra raudonos safranino spalva. Antruoju atveju gramneigiamos bakterijos praranda violetinio kristalo spalvą spalvos pakitimo metu, todėl safraninas dažo gramneigiamas bakterijas raudonai.

Be to, safraninas naudojamas bakteriologijoje ruošiant Brucella agaro terpę, praskiedžiant safraniną santykiu 1: 5000. Ši terpė skirta atskirti Brucella suis rūšis nuo likusių rūšių. Šioje terpėje auga Brucella melitensis ir Brucella abortus, tačiau B. suis yra slopinamas.

Agrarinėje pramonėje safranino buvo panaudota 2,25% ir praskiestas santykiu 1:10, norint nudažyti kamieninius mėginius iš cukranendrių augalo.

Šį augalą dažniausiai veikia bakterijos Leifsonia xyli subsp. xyli, kuris kenkia augalo ksilimui. Nudažyti stiebai įvertinami siekiant nustatyti ksilomų indų funkciją.

Bakteriologijos srities metodai

Castañeda dėmė r dažymui

Kraujo ar audinio tepinėlis dedamas į buferinį tirpalą (fosfato buferis, pH 7,6). Leiskite savaime išdžiūti, tada 3 minutes uždenkite metileno mėlynuoju ir apdenkite safraninu. Rickettsiae yra mėlynos spalvos, kontrastingos raudoname fone.

Koster dėmė modifikuota

Uždedamas tepinėlis ir deginamas žiebtuvėlyje. Po to jis 1 min. Uždengiamas 2 dalių sočiųjų vandeninių safraninų ir 3 dalių 1 mol / L KOH tirpalo mišiniu. Plaunama distiliuotu vandeniu ir užpilama 1% karbolio metileno mėlynojo.

Jei mėginyje yra Brucella genties bakterijų, mėlyname fone jos bus oranžinės.

Bakterijų kapsulės dažymas

Bakterijų suspensijos mišinys pagamintas su Indijos rašalu ir pridedamas safraninas. Po mikroskopu aplink kiekvieną bakterijos kapsulę su juodu fonu pasirodys rausvas halodas.

Sporų dažymas

Padalijama su bakterijų suspensija. Tada jis tvirtinamas šiluma. Jis padengtas 5% malachito žalia, dažnai liepsnojantis, kol išsiskiria garai. Procesas kartojamas 6-10 minučių. Galiausiai jis plaunamas vandeniu ir 30 sekundžių palaikomas 0,5% safraninu. Bakilio spalvos raudonos, o sporos žali.

„Gram-Hucker“ dėmė

Tepinėlis gaminamas su bakterijų suspensija ir fiksuojamas karštyje. Objektinę stiklinę 1 minutę uždenkite krištoliu violetiniu. Tada lugolis dedamas kaip švitinimo tirpalas 1 minutę. Vėliau jis balinamas acetono alkoholiu ir 30 sekundžių galutinai ištirpinamas safraninu.

Gram teigiamos bakterijos nusidažo melsvai violetinėmis, o gramneigiamos bakterijos - raudonai.

Kai kurios laboratorijos nustojo naudoti „Gram-Hucker“ metodą, kad pritaikytų modifikuotą „Gram-Kopeloff“ metodą. Pastarojoje safraninas yra pakeistas baziniu fuksinu. Taip yra todėl, kad safraninas silpnai dažo Legionella, Campylobacter ir Brucella genčių rūšis.

Histologijos srities metodai

Kulchitsky ląstelių dažymas (enterochromaffins)

Audinių pjūviai iš virškinimo trakto dažomi sidabro chloridu. Tada jis nuspalvinamas natrio tiosulfatu ir galiausiai ištirpinamas safraninu.

Kulchitsky ląstelės išsiskiria juodai rudų granulių buvimu.

Osteoartrito dėmė

Kadangi safraninas turi teigiamą krūvį, jis labai gerai jungiasi su glikozaminoglikanų karboksilo ir sulfato grupėmis. Tai yra dalis proteoglikanų, sudarančių sąnarinę kremzlę. Šia prasme, dažant safraninu O, galima nustatyti, ar nėra kremzlės.

Kremzlinio audinio praradimas gali būti matuojamas naudojant Mankin skalę arba dar vadinamą osteoartrito skale.

Technika paaiškinta žemiau: histologinis pjūvis panardinamas į dėklą su Weigerto geležies hematoksilino tirpalu, po to praleidžiamas per rūgštinį alkoholį ir plaunamas vandeniu.

Tęskite dažymą, panardindami skaidrę į greitai žaliuojančią, ji plaunama acto rūgštimi ir dabar yra panardinta į safraniną O. Norėdami baigti procesą, jis dehidratuojamas didėjančia tvarka naudojant skirtingos koncentracijos alkoholius. Atliekant paskutinį žingsnį, mėginys nuskaidrėja.

Objektyvai yra kondicionuojami Kanados balzamu arba panašiu būdu, kurį galima pastebėti po mikroskopu.

Taikant šią metodiką, branduoliai dažomi juodai, kaulas žalias ir kremzlė, kurioje proteoglikanai randami raudonai.

Dėmės makrodumbliams identifikuoti

2003 m. Pérez ir kt. Pasiūlė paprastą ir nebrangų metodą dažyti makrodumblius. Mėginiai ruošiami histologiniuose parafino skyriuose. Skyriai pritvirtinami 1% glicerinu, leidžiant jiems visiškai išdžiūti. Po to jis dedamas į ksilolą, kad pašalintų parafiną.

Skyrius rehidratuojamas po 2 minutes kiekvienoje plokštelėje, einant per keletą plokštelių, turinčių skirtingo koncentracijos etanolio (mažėjančia tvarka).

Vėliau jis 5 minutes dažomas 1% safranino ir 1% toluidino mėlynojo mišinio santykiu 3: 1, abu paruošti naudojant 50% etanolio. Į mišinį pridedami trys lašai picos rūgšties, kuri veikia kaip šarmas.

Tada jis dehidratuojamas dar kartą praeinant pro alkoholio padėklus, tačiau šį kartą kylančia tvarka. Galiausiai jis praplaunamas ksiloliu ir mėginys paruošiamas Kanados balzamu, kurį reikia stebėti.

Toksiškumas

Laimei, safraninas yra dažai, kurie nekelia pavojaus tiems, kurie jį naudoja. Tai yra nekenksmingas dažiklis, jis nėra kancerogeniškas ir nedegus.

Tiesioginis sąlytis su oda ar gleivine gali sukelti nedidelį paraudimą vietoje, be didelių komplikacijų. Tam rekomenduojama paveiktą vietą plauti dideliu kiekiu vandens.

Nuorodos

1. García H. Colorante safranina O. Sveikatos priežiūros specialistė, 2012; 1 (2): 83–85. Galima rasti: medigraphic.com
2. Gil M. Gramo dėmė: pagrindas, medžiagos, technika ir panaudojimas. 2019.Apie prieinamas: lifeder.com
3. Gil M. Spore dažymas: pagrindimas, būdai ir panaudojimas. 2019.Apie prieinamas: lifeder.com
4. Safranina “. Vikipedija, nemokama enciklopedija. 2017 m. Kovo 7 d., 10:39 UTC. 2019 m. Rugpjūčio 3 d., 20:49 en.wikipedia.org
5. Pérez-Cortéz S, Vera B, Sánchez C. Naudingas dažymo būdas anatomiškai aiškinant Gracilariopsis tenuifrons ir Gracilaria chilensis (Rhodophyta). Aktas Botas. Venesas. 2003; 26 (2): 237–244. Galima rasti: scielo.org.
6. Aleikos bažnyčia, „Peralta Esther Lilia“, „Alvarez Elba“, Milián J, Matos Madyu. Ksilelinių indų funkcionalumo ir Leifsonia xyli subsp. xyli. Veg apsauga. 2007; 22 (1): 65–65. Galima rasti: scielo.sld