- Pamatai ir medžiagos
- medžiagos
- Žingsniai
- Makroskopinis ir mikroskopinis tyrimas
- Originali „Fausto“ technika
- Fausto technika centrifuguojant
- Privalumas
- Trūkumai
- Nuorodos
Faustas technika yra metodika, kuri leidžia kai kurių kiaušinių ir / ar lervų parazitų, esančių išmatomis plūdriosiomis koncentraciją. Jis naudojamas, kai tiesioginiai koproparazitologiniai tyrimai yra neigiami arba kai norite gauti švarius mėginius, kuriuose nėra detrito.
Koproparazitologiniams tyrimams naudojami trijų tipų koncentracijos metodai: flotacija, sedimentacija arba metodai, sujungiantys du ankstesnius. Šie metodai padidina teigiamų rezultatų tikimybę.
Išmatų analizė.
Fausto metodas susideda iš išmatų mėginio dalies sumaišymo su medžiaga, tankesne už koncentruotus kiaušinius ar parazitus. Dėl to, būdami ne tokie tankūs, jie plūduriuoja paviršiuje. Skystis supernatantas yra surenkamas ir stebimas mikroskopu, kad būtų galima nustatyti ir įvertinti.
Šis metodas naudojamas vizualizuoti helminto kiaušinius. Tuo pačiu metu jis pasirodė esąs labai jautrus Giardia lamblia diagnozės metodas - plačiai paplitęs visame pasaulyje paplitęs pirmuonis. Plaukimo metodai nerekomenduojami labai sunkiems parazitų kiaušinėliams, tokiems kaip kaspinuočiai ir trematodai.
Parazitai yra viena iš labiausiai paplitusių žarnyno infekcijų visame pasaulyje, ypač skurdiose šalyse, kuriose yra prastos sanitarinės priemonės. Dėl šios priežasties turint jautrių metodų šiems parazitams identifikuoti ir kiekybiškai įvertinti, tai yra labai naudinga diagnozei ir gydymui.
Pamatai ir medžiagos
Metodas pagrįstas kiaušinių, parazitų, cistų, lervų ir detrito specifinio sunkio laipsnio egzistavimu, kaip flotavimo metodą naudojant cinko sulfato tirpalus.
Metodo pagrindas yra maišyti mėginį su cinko sulfato tirpalu, kurio tankis yra didesnis nei lengvesnių kiaušinių, lervų ar parazitų.
Tai leidžia sunkesniems elementams iškristi, o lengvesniems - plūduriuoti, atsirandantiems supernatante po centrifugavimo.
medžiagos
Išmatų mėginių surinkimo indai (Šaltinis: „Bobjgalindo“ per „Wikimedia Commons“)
- Paruoškite cinko sulfato tirpalą, kurio tankis yra 1,18 arba 1,2 g / ml, jei mėginys buvo anksčiau apdorotas.
- Paruoškite stovą su anksčiau paženklintais mėgintuvėliais.
- Turėkite išcentrinę mašiną.
- Ant rankų turėkite mikroskopo skaidres ir dangtelius. Visi turi būti paženklinti
- Įsitikinkite, ar yra „Lugol“ tirpalo lakštams dažyti.
- Filtruokite marlę.
- Turėkite piltuvus ir distiliuotą vandenį.
- Raskite etiketes su plastikinėmis ar kartoninėmis pakuotėmis.
- Taip pat aplikatoriai ir 5 mm sterili rankena.
- Žiebtuvėlis, skirtas sterilizuoti rankeną.
Žingsniai
Makroskopinis ir mikroskopinis tyrimas
Bet kokio išmatų tyrimo metu tyrimas pradedamas vadinamuoju „bendruoju pavyzdžių tyrimu“.
Aprašyta konsistencija, spalva, tai, kas atrodo kraujas, gleivės ir suaugusiųjų parazitai.
Tada pereiname prie išmatų „mikroskopinio tyrimo“, tai priklauso nuo metodo. Paprasčiausias yra tiesioginio tepinėlio metodas, kuris yra paprasčiausias mikroskopinio parazitų stebėjimo metodas.
Žarnyno parazito Gardia lamblia stebėjimo nuotrauka (šaltinis: „Riddlemaster“ per „Wikimedia Commons“)
Procedūra apima nedidelio mėginio kiekio padėjimą tiesiai ant stiklelio. Įlašinkite kelis lašus fiziologinio tirpalo, kurio dydis turėtų būti panašus į bandinį. Sumaišykite druskos tirpalą su išmatomis, kol susidarys vienalytis mišinys. Uždėkite dangtelį ir ištirkite po mikroskopu.
Originali „Fausto“ technika
Antroji procedūra susideda iš Fausto plūdės metodo, kurio pradinę versiją sudaro:
1 - Įpilkite maždaug dviejų gramų išmatų į tam skirtą indą.
2 - Įpilkite 30 ml cinko sulfato flotacijos tirpalo, su kuriuo gaminama emulsija, sumaišydami tirpalą su išmatomis.
3 - Įtempkite metaliniu filtru į antrą indą ir perpilkite į mėgintuvėlį.
4- Įpilkite daugiau flotacinio tirpalo, kol mėgintuvėlyje susiformuos meniskas.
5- Ant menisko uždėkite stiklinį dangtelį. Leiskite pailsėti 10–15 minučių.
6- Nuimkite dangtelį ir padėkite jį ant stiklelio, kuris bus tiriamas po mikroskopu.
Fausto technika centrifuguojant
Iš pradžių metodas nebuvo naudojamas centrifugavimas, tačiau dabar jis įtrauktas, nes gaunami geresni rezultatai. Norint atlikti tinkamą procedūrą, reikia atlikti kelis veiksmus:
1 - išmatos plaunamos vandeniu, gerai išmaišomos ir po to filtruojamos su keturiomis dalimis sulankstyta marle. Mėginys dedamas į mėgintuvėlį.
2 - Centrifuguokite ir nuimkite supernatantą (mėginiai, laikomi virš vandens). 1 ir 2 veiksmai kartojami, kol supernatantas tampa „skaidrus“.
3 - Į filtruojamą ir centrifuguotą mėginį pridedama cinko sulfato.
4- Tai gerai išmaišoma.
5- Dar kartą centrifuguokite 1 minutę, esant 2500 aps./min. (Apsisukimai per minutę).
6- Supernatantas išgaunamas sterilia maždaug 5 mm kilpa; vamzdeliai neturėtų būti purtomi.
7- Iš supernatanto išgautas mėginys dedamas ant stiklelio ir lašą „Lugol“ galima nuspalvinti, dangtelio dangtelis dedamas ir stebimas po mikroskopu.
8- Talpyklos ir mėgintuvėliai yra paženklinti.
Privalumas
- Diagnozei nustatyti elementai gali būti matomi švarūs ir be „detrito“. Tai palengvina lapo stebėjimą ir sumažina diagnozei sunaudojamą laiką.
- Supernatante atsigauna lervos, kiaušiniai ir (arba) cistos.
- Tai labai nebrangus metodas.
- Procedūra yra labai paprasta ir lengvai įgyvendinama.
- Diagnozė yra greita ir tiksli.
- Dėl parazitozės svarbos ir didelio paplitimo skurdžiose šalyse šie pigūs ir lengvai naudojami metodai yra idealūs diagnozuojant ir stebint šias patologijas.
Trūkumai
Plaukiojančio tirpalo tankis lervoms susitraukia, tai yra, jos susitraukia ir per labai trumpą laiką gali deformuotis. Tai verčia egzaminuotoją nedelsiant nustatyti diagnozę, o apdoroti mėginiai negali būti laikomi būsimiems tyrimams.
Kaip ir naudojant visus mikroskopinius identifikavimo metodus, tikslioms diagnozėms nustatyti reikalingas patyręs egzaminavimo personalas.
Greita diagnozei reikalingų elementų deformacija, nors jie ir yra akivaizdus trūkumas, gali būti ištaisyta nedelsiant atliekant mikroskopinius stebėjimus.
Nuorodos
- Ananias, FL (2017). Fausto metodo ir savaiminio nusėdimo jautrumo įvertinimas diagnozuojant giardiazę. „Cuban Journal of Tropical Medicine“, 68 (2).
- Bartlett, MS, Harper, K., Smith, N., Verbanac, P., & Smith, JW (1978). Palyginamas modifikuoto cinko sulfato flotavimo būdo įvertinimas. Klinikinės mikrobiologijos žurnalas, 7 (6), 524–528.
- Beckeris, AC, Kraemeris, A., Epe, C., & Strube, C. (2016). Pasirinktų koproskopinių metodų - sedimentacijos, kombinuoto cinko sulfato sedimentacijos - flotavimo ir McMaster metodo jautrumas ir efektyvumas. Parasitologijos tyrimai, 115 (7), 2581–2587.
- Garcia, LS, Arrowood, M., Kokoskin, E., Paltridge, GP, Pillai, DR, Procop, GW,… & Visvesvara, G. (2018). Laboratorinė parazitų iš virškinimo trakto diagnozė. Klinikinės mikrobiologijos apžvalgos, 31 (1), e00025-17.
- „Summers“, WA (1942). Cinko sulfato išcentrinio flotavimo metodo modifikacija helminto kiaušialąstėms atkurti įformintuose išmatose. Journal of Parasitology, 28 (4), 345-346.