- Dažai naudojami paprastam dažymui
- 6 žingsniai iki paprasto dažymo
- 1 žingsnis
- Stebėjimas
- 2 žingsnis
- Stebėjimas
- 3 žingsnis
- 4 žingsnis
- Stebėjimas
- 5 žingsnis
- Nuorodos
Vieno dažymo yra dažymo procedūra greitas ir paprastas, kurioje naudojamas vieno dažų, todėl ji vadinama paprasta. Jis daugiausia naudojamas mėginyje esančių ląstelių morfologijai ir organizacijai nustatyti.
Ląstelės yra natūraliai bespalvės, todėl žiūrint po mikroskopu būtina, kad jos būtų matomos.
Žmogaus skruostų ląstelės dažomos paprastu metileno mėlynos spalvos dažymu.
Svarbu atkreipti dėmesį į tai, kad dažymui naudojami dažai turi būti baziniai su teigiamu krūviu (katijoniniai), kad jie galėtų savaime prisijungti prie ląstelės sienos ir citoplazmos.
Šios ląstelių struktūros yra neigiamai įkrautos. Dėl šios priežasties teigiamai įkrautas dažiklis pritraukia ląsteles ir prisijungia prie jų spontaniškai. Taigi visos mėginyje esančios ląstelės greitai nudažomos.
Dažai naudojami paprastam dažymui
Yra keletas pagrindinių dėmių, kurias galima naudoti mikrobiologijos laboratorijoje. Dažniausiai naudojamos:
- metileno mėlyna.
- Kristalų violetinė.
- Malachito žalia.
- Pagrindinis fuksinas.
Visi šie dažai gerai veikia bakterijas, nes turi teigiamai įkrautus (katijoninius) spalvų jonus (chromoforus).
Daugelio šių dėmių dažymo laikas yra gana trumpas. Paprastai jie trunka nuo 30 sekundžių iki 2 minučių, priklausomai nuo dažų afiniteto.
Svarbu nepamiršti, kad prieš dažant mėginį paprastu dažymu, jis turi būti išplėstas ir pritvirtintas prie stiklo stiklelio (stiklelio); išplėstas ir fiksuotas mėginys vadinamas tepinėliu.
6 žingsniai iki paprasto dažymo
1 žingsnis
Padėkite skaidrę ant dažymo lentynos ir užtepkite norimą dėmę. Leiskite atitinkamam laikui veikti.
Paprastai paprastas dažymas užtrunka nuo kelių sekundžių iki kelių minučių, atsižvelgiant į naudojamą dėmę.
Stebėjimas
Šiame etape svarbu neviršyti rekomenduojamo dažų naudojimo laiko, nes ant lakšto gali susidaryti kristalai, gaminantys vadinamuosius „artefaktus“, kurie iškreipia ląstelių morfologiją.
2 žingsnis
Kruopščiai nuplaukite tešlą iš stiklinės distiliuotu vandeniu iš butelio arba lėtai tekančiu vandentiekio vandeniu, kol nuotėkis pasidarys skaidrus. Paprastai tai trunka 5-10 sekundžių.
Stebėjimas
Netepkite vandens srovės tiesiai ant tepinėlio, kad išvengtumėte to paties jėgos pakenkimo mėginiui.
Jei neturite distiliuoto vandens, be problemų galite naudoti vandenį iš čiaupo, nes tai neturės įtakos dažymo rezultatui.
3 žingsnis
Pridenkite stiklelį absorbentais popieriniais rankšluosčiais viena kryptimi ir netrindami. Įsitikinkite, kad skaidrės apatinė dalis yra švari.
4 žingsnis
Stebėkite dažytą tepinėlį po mikroskopu. Pradėkite nuo tolimiausių tikslų, kad tinkamai nustatytumėte zoną, kurią norite stebėti išsamiau. Pakeiskite tikslą, kad priartėtumėte arčiau imties.
Stebėjimas
Norint naudoti objektyvą su didesniu padidinimu (paprastai 100x), turėtų būti naudojama panardinimo alyva, nes tai padeda šviesai prasiskverbti geriau, o vaizdas atrodo ryškesnis. Nebūtina naudoti dangtelio.
5 žingsnis
Galiausiai visus mėginius išmeskite į tinkamą talpyklą, ant kurios būtų tinkamai užrašyta „biologinis pavojus“.
Nuorodos
- (2001). Mikrobiologiniai pritaikymai: Bendrosios mikrobiologijos laboratorinis vadovas (8 -asis leidimas). „McGraw-Hill“ kompanijos.
- Harisha, S. (2006). Įvadas į praktinę biotechnologiją (1 -asis ). „Firewall Media“.
- Moyes, RB, Reynolds, J., ir Breakwell, DP (2009). Preliminarus bakterijų dažymas: paprastos dėmės. Dabartiniai mikrobiologijos protokolai (15 PRIEDAS), 1–5.
- Pommerville, J. (2013). Alcamo mikrobiologijos laboratorijos pagrindai (10 -oji ). Jones ir Bartlett mokymasis.
- Prescott, H. (2002). Laboratoriniai pratimai mikrobiologijoje (5 kl. ). „McGraw-Hill“ kompanijos.
- Sumbali, G. ir Mehrotra, R. (2009). Mikrobiologijos principai (1 -asis ). Tata McGraw-Hill išsilavinimas.