KRAUJO KULTŪRA: KAM JI SKIRTA, PAGRINDIMAS, PROCEDŪRA, REZULTATAI - BIOLOGIJA - 2025

Kraujo kultūra yra bakteriologinis tyrimas, kuriuo siekiama aptikti mikroorganizmų buvimą kraujyje. Kraujas yra sterilus skystis, todėl turi būti laikomas fiziologinėmis sąlygomis, todėl bakterijų ar grybelių kiekis kraujyje visada yra patologinis.

Kai kraujyje randama bakterijų ar grybelių, tačiau jų dauginimasis neviršija mikroorganizmų pašalinimo iš imuninės sistemos, jis vadinamas bakteremija (bakterijoms) arba fungemia (grybeliams); Bet jei mikroorganizmų skaičius nekontroliuojamai padidėja, tai vadinama septicemija.

Kraujo kultūros buteliai (geltona: vaikų aerobiozė, žalia: suaugusiųjų aerobiozė ir raudona: suaugusiųjų anaerobiozė). Šaltinis: autoriaus magistrantės Marielsa Gil fotografija.

Bakteremija, fungemija ir septicemija kelia pavojų paciento gyvybei, todėl jas reikia nedelsiant gydyti. Štai kodėl, įtarus infekciją kraujyje, gydytojai paprašo atlikti kraujo kultūros tyrimą.

Ši bakteriologinė analizė leidžia sužinoti, ar kraujyje nėra infekcijos, ar tai yra mikroorganizmas. Be to, jei jis yra teigiamas, atliekamas jautrumo testas, siekiant sužinoti, kuris antibiotikas ar priešgrybelinis gydymas galėtų būti naudojamas gydyme.

Kita vertus, jei kraujo kultūra per 24 inkubacijos valandas yra neigiama, jos negalima išmesti, kol ji nebus neigiama 240 valandų. Tai užtikrina, kad nėra lėtai augančių mikroorganizmų.

Kad kraujo kultūra būtų patikima, imant mėginį turi būti imamasi griežtų aseptikos priemonių, o tyrimo patikimumui ir jautrumui padidinti reikia paimti bent du mėginius karščiavimo metu ar šalia jo.

Kam tai?

Kraujas yra sterilus skystis, o kai jame randama mikroorganizmų, jis yra 100% patologinis. Ši situacija atspindi labai subtilų klinikinį vaizdą, kenkiantį paciento gyvenimui.

Kraujo kultūra yra svarbus bakteriologinis tyrimas, kurio metu nustatomi mikroorganizmai kraujyje.

Mikroorganizmai gali patekti į kraują skirtingais būdais, tai gali būti ekstravaskulinės infekcijos, tokios kaip: pneumonija, pilvo ertmės infekcijos, pielonefritas, rimtos odos, minkštųjų audinių ar artrito infekcijos.

Arba tai gali būti ir į veną, pavyzdžiui, intraveninių ar arterinių kateterių užteršimas, endokarditas, narkomanija į veną, užterštų vaistų ar tirpalų skyrimas ir kt.

Laiku nustatyti ir gydyti sepsio sukėlėją yra būtina norint užtikrinti paciento išgyvenimą.

Šia prasme gydytojas, nurodydamas požymius ir simptomus, rodančius sepsiją, pvz., Karščiavimą (aukštesnę nei 38 ° C), jei nėra akivaizdaus infekcinio židinio, arba, priešingai, hipotermiją (<de 36 ° C).

Kiti požymiai gali būti: šaltkrėtis, padidėjęs baltųjų kraujo kūnelių skaičius (> 10 000 ląstelių / mm ³ ) arba reikšmingas polimorfonuklearinių ląstelių sumažėjimas (<1 000 PMN / mm ³ ). Be daugelio kitų organų pablogėjimo ar gyvybingumo praradimo, be kitų įspėjamųjų ženklų.

Bakteremija gali būti nuolatinė, trumpalaikė ar protarpinė. Tai svarbu imant mėginį, nes jį reikia imti tada, kai yra didesnė tikimybė, kad mikroorganizmas cirkuliuoja.

Todėl rekomenduojama paimti mažiausiai 2 mėginius skirtingose ​​vietose. Be to, idealiausia, kai mėginys imamas esant karščiavimo piko metu arba kai pacientui pasireiškia drebulys, ekstremali hipotermija, prakaitavimas ar tachikardija.

Tačiau norint, kad kraujo kultūra būtų tikrai naudinga priemonė, mėginys turi būti imamas labai atsargiai. Netinkamas manipuliavimas ar blogas asepsis mėginio paėmimo metu gali padaryti testą negaliojančiu ir gauti klaidingą teigiamą rezultatą.

Pagrindas

Tyrimą sudaro dviejų ar trijų kraujo mėginių paėmimas aseptiškai ir supilstymas į specialius butelius.

Specialūs prietaisai kraujo mėginiams auginti yra vadinami kraujo kultūros buteliais. Jie skirstomi į:

Pagal paciento amžių

- Vaikų vartojimas

-Paaugusiems.

Pagal mikroorganizmo tipą

- Aerobinių mikroorganizmų (aerobinių bakterijų, fakultatyvinių bakterijų ir grybelių) kolbos.

- Kraujo kultūros buteliukai, skirti anaerobiniams mikroorganizmams (griežtoms anaerobinėms bakterijoms).

Kai kuriuose yra skysta auginimo terpė, o kituose - kietoji ir skystoji terpė tuo pačiu metu. Jie taip pat egzistuoja su aktyvuotos anglies dalelėmis.

Procesas

Atrankos rekomendacijos

- Mėginį turi paimti kvalifikuoti ir apmokyti darbuotojai mikrobiologijos srityje.

- Neabejotinai svarbiausias žingsnis yra asepsis arba kruopštus mėginių paėmimo vietos valymas.

- Kaip ir visų mėginių ėmimo metu, sveikatos priežiūros personalas proceso metu turi visiškai laikytis biologinio saugumo priemonių (be kita ko, naudoti pirštines, chalatą, akinius).

- Pasirūpinkite, kad būtų visi reikiami pavyzdžių paėmimo įrankiai.

- Ant buteliukų etiketės nurodykite visą paciento vardą, pavardę, datą, medicinos įrašo numerį, mėginių paėmimo laiką ir laboratorijos eilės numerį.

- Idealiausia yra paimti mėginį prieš pradedant pacientą nuo antimikrobinių vaistų. Tik tuo atveju nurodoma, kad įtariamas vykdomo gydymo neveikimas. Tokiu atveju mėginys turi būti paimtas prieš keičiant vaistą, naudojant kraujo kultūros butelius su antibiotikų inhibitoriais (aktyvuotos anglies dalelėmis).

- Būtina paimti bent 2 mėginius skirtingose ​​anatominėse vietose, tokiose kaip dešinė ir kairė rankos. Įtarus endokarditą, rekomenduojami 3 mėginiai. Į kiekvieną mėginį bus įtraukti du buteliai (vienas skirtas aerobiozei, kitas - anaerobiozei).

Mėginio kiekis

Mėginio kiekis kinta priklausomai nuo paciento amžiaus, tačiau kraujo ir kultūros sultinio skiedimo santykis visada turėtų būti 1: 5 ir 1:10.

Naujagimiams rekomenduojamas mėginio kiekis yra 1 ml kraujo viename buteliuke. Vaikų butelis naudojamas.

Kūdikiams nuo vieno mėnesio iki vienerių metų jis gali būti padidintas iki 1,5 ml kraujo viename buteliuke. Vaikų butelis naudojamas.

Vyresniems kaip 2 metų vaikams tinkamas mėginio kiekis buteliuke yra 2,5 ml kraujo. Vaikų butelis naudojamas.

Nuo paauglystės jo kiekį kraujyje galima padidinti nuo 5 iki 10 ml buteliuke. Naudojamas suaugusiųjų butelis.

Pagaliau suaugusiam žmogui reikia 8-10 ml buteliuko. Naudojamas suaugusiųjų butelis.

Mėginių ėmimas

- Kraujo mėginys gali būti veninis arba arterinis. Tačiau arterinis kraujas imamas tik tada, kai neįmanoma paimti venų.

- Nerekomenduojama imti mėginio iš centrinio veninio kateterio, nebent:

1. Neįmanoma paimti mėginio periferiškai (veniniu ar arteriniu).
2. Pacientai, kuriems gresia kraujavimas.
3. Kai gydytojas įtaria bakteriemiją dėl užteršto centrinio veninio kateterio.
4. Kai karščiavimas vėl atsiranda po 4–5 dienų karščiavimo, nepriklausomai nuo to, ar pacientas gydomas antimikrobiniais vaistais, ar ne.

Asepsis prieš imant mėginius

- Mėginių ėmimui pasirinkite anatomines vietas. Paprastai parenkamos geriausio kalibro venos (bazilikinė arba cefalinė).

- Remiantis Ligos kontrolės centrais (CDC) Atlantoje (JAV), prieš imdamas mėginius, operatorius, be pirštinių, turi nusiplauti rankas 2% chlorheksidino arba 10% povidono jodo.

-Palupuokite ir suraskite naudotiną veną.

-Švariai pravalykite punkcijos vietą, atlikdami judesius iš centro į išorę, naudodami muiluotą chlorheksidiną arba antiseptinį muilą. Nuplaukite steriliu druskos tirpalu.

Vėliau užtepkite antiseptiko ir leiskite jam veikti. 0,5% chlorheksidino gliukonato pavyzdys 1 minutę arba 10% povidono jodas 2 minutes. Dėl pastarojo pirmiausia paklauskite, ar pacientas nėra alergiškas jodui. Jei esate alergiškas, galite pakeisti 70% alkoholio.

Mėginio paėmimas

- Padėkite žirklį, kad pablogėtų kraujotaka ir išsiplėstų venos.

- Vėl nelieskite punkcijos vietos pirštu. Jei tai yra absoliučiai būtina, pirštą reikia plauti taip pat, kaip punkcijos vietą.

- Į veną įkiškite injektoriaus adatą arba galvos odą ir ištraukite reikiamą kiekį kraujo.

- Nuneškite adatą ant medvilnės ar marlės, jei ji nėra sterili.

- Labai atsargiai ir neliesdami dangtelio, išimkite iš butelių apsauginę plombą. Kai kurie autoriai prieš inokuliuodami mėginį rekomenduoja dezinfekuoti dangtelį.

- Buteliukuose paskirstykite reikiamą kiekį kraujo. Jei mėginys imamas su purkštuku, reikiamas kiekis pirmiausia supilamas į anaerobinę kolbą, o po to į aerobinę kolbą. Jei imama galvos oda (drugelis), ji pilama priešingai.

- Kruopščiai sumaišykite kraujo kultūros buteliuką apversdami.

- Pakeiskite pirštines ir pakartokite ankstesnius antrojo pavyzdžių rinkinio veiksmus.

-Jei antrasis mėginys paimtas iš kitos vietos, tai galima padaryti nedelsiant, tačiau jei jis yra iš tos pačios vietos, tarp kito ir kito mėginio turite palaukti 30–90 minučių.

- Mėginys turi būti kuo greičiau paimtas į laboratoriją. Jei tai neįmanoma, jis turi būti laikomas kambario temperatūroje iki 18 valandų.

Kultūra

Kolbos, esančios laboratorijoje, inkubuojamos 37 ° C temperatūroje kiekvienos kolbos sąlygomis, tai yra atitinkamai aerobiozės ir anaerobiozės sąlygomis.

Pagal rankinį metodą skambėjimas turėtų būti pradedamas 24-osios inkubacijos valandos, o paskui skambėjimas atliekamas kiekvieną dieną. Žiedai atliekami taip: pirmiausia butelio dangtelis dezinfekuojamas ir įstatoma sterili injektoriaus adata. Skystis ekstrahuojamas iš kolbos ir sėjamas į kraujo agarą ir šokolado agarą.

Jei yra augimo, atliekamas gramas, subkultūros tam tikrose terpėse, biocheminiai tyrimai ir antiiograma.

Automatizuotu būdu „Bact“ / „Alert“ įranga skleidžia aliarmą, kai nustato, kad buteliukas yra teigiamas. Tuo pačiu būdu jis turėtų būti tepamas ant kraujo agaro ir šokolado agaro.

Kitas populiarėjantis metodas yra analizuoti kolbą po 6 valandų inkubacijos naudojant masės spektrometriją. Šis metodas padėjo padidinti diagnozės jautrumą ir greitį.

Rezultatai

Jei kraujo kultūros buteliukas neigiamas, gydomam gydytojui gali būti pateiktos preliminarios tarpinės ataskaitos. Ataskaitoje nurodoma, kad per kelias valandas jis buvo neigiamas. Pvz., Jei jis neigiamas iki ketvirtosios dienos, jis nurodomas taip:

Preliminarus rezultatas: neigiama kultūra 96 ​​inkubacijos valandomis.

Pastaba: tyrimas tęsiamas 240 valandų.

Jei kraujo kultūra yra teigiama, nedelsiant informuojamas gydantis gydytojas ir išsiunčiama ataskaita, nurodant bent kolonijos gramą. Pavyzdys:

Preliminarus rezultatas: teigiamoje kultūroje po 48 inkubacijos valandų stebimos gramneigiamos bacilos ir neigiama oksidazė. Šiuo metu vyksta identifikacija ir jautrumo bandymai.

Ši informacija nurodo gydantį gydytoją pradėti empirinę terapiją dėl galimo mikroorganizmo, laukiant galutinio laboratorijos rezultato.

Baigę bakteriologinį tyrimą, tai yra, identifikuoti mikroorganizmą ir gauti antiiogramą, galutinė ataskaita turėtų būti išsiųsta kuo greičiau.

Ypač reikia atsargiai, jei tikslinis organizmas yra Neisseria gonorrhoeae arba Neisseria meningitidis, nes šios bakterijos yra slopinamos esant didelėms natrio polianetosulfonato (SPS) koncentracijoms.

Štai kodėl kraujo kultūros buteliuose šis junginys neturėtų viršyti 0,025%.

Kita vertus, jei kraujo kultūros mėginys pirmą kartą paimamas iš Vacutainer mėgintuvėlių, šiuose mėgintuvėliuose yra toksiškos meningokokams ir gonokokams SPS koncentracijos, todėl kraujas per 1 valandą turi būti perneštas į sultinio kultūros sistemą.

Kaip sužinoti, ar kraujo kultūra yra teigiama, ar užteršta

Kraujo kultūra laikoma užteršta, kai iš viso paimto kraujo kultūros buteliuko auga. O įtarimas dėl užkrėtimo padidėja, jei išskirtas mikroorganizmas yra normalios odos mikrobiota: pavyzdys: koaguliazės neigiamas Staphylococcus, Propionibacterium spp.

Tačiau pacientams, kurių imunitetas susilpnėjęs, nereikėtų pamiršti jokio mikroorganizmo, tačiau tokiu atveju mikroorganizmas turėtų atsirasti keliuose mėginiuose.

Kita vertus, jei to paties mikroorganizmo, išskirto iš dviejų skirtingų mėginių, jautrumas antibiotikams yra vienodas, infekcija yra tikra.

Kita ypatybė yra bakterijų krūvis, nes užterštos kraujo kultūros vėluoja, o negydomų pacientų tikrosios infekcijos paprastai būna teigiamos per 14 inkubacijos valandų, kai mikroorganizmas netrukdo.

Kita vertus, pacientams, gydomiems antimikrobiniais vaistais, dalyvaujančių mikroorganizmų augimas gali užtrukti, nes jų krūvis labai mažas.

Dėl daugiau nei vieno mikroorganizmo atsiradimo gali būti užteršimas, tačiau jei tas pats rezultatas pakartojamas keliuose kadruose iš skirtingų vietų, tada jis yra tikras.

Nuorodos

1. "Kraujo kultūra". Vikipedija, nemokama enciklopedija. 2019 m. Liepos 3 d., 17:28 UTC. 2019 m. Liepos 14 d., 19:05 en.wikipedia.org
2. Hervé B. Naujos mikrobiologinės diagnostikos technologijos: automatizavimas ir kai kurios programos mikrobų identifikavimui ir jautrumui tirti. Medicinos klinika Skaičiuoja. 2015; 26 (6) 753-763. Galima rasti svetainėje: reader.elsevier.com
3. Villarroel P. 20 skyrius. Sepsis ir širdies ir kraujagyslių ligų rizika. Širdies ir kraujagyslių sveikata. 187–194 psl. Galima rasti: fbbva.es
4. Sánchez R, Rincón B, Cortés C, Fernández E, Peña S, Heras EM Kraujo kultūros: Ką jie jums pasakė ir ką jūs darote? Ligos glob. 2012; 11 (26): 146–163. Galima rasti svetainėje: scielo.isc
5. „Pardinas-Llergo M“, „Alarcón-Sotelo A“, „Ramírez-Angulo C“, „Rodríguez-Weber F“, „Díaz-Greene“ E. Teigiamos kraujo kultūros gavimo sėkmės tikimybė. „Interna Mex“. 2017; 33 (1): 28–40. Galima rasti: scielo.org