KRAUJO TEPINĖLIS: CHARAKTERISTIKOS, TIPAI, BŪDAI IR HISTOLOGIJA - BIOLOGIJA - 2024

Kraujo tepinėlis yra periferinio kraujo tepinėlį , kad yra naudojamas analizuoti komponentus, esančių kraujotakos. Kraujo tepinėlio stebėjimas suteikia hematologinius duomenis, kurie yra labai naudingi diagnozuojant ir stebint daugelį patologijų.

Kraujo tepinėlis leidžia kiekybiškai įvertinti skirtingų tipų baltųjų kraujo kūnelių skaičių (leukocitų formulė), taip pat išanalizuoti eritrocitų, leukocitų ir trombocitų morfologiją ir formą.

Kraujo tepinėlio paruošimas. Šaltinis: kraujas laboratorinėje stiklinėje. „Public DomainPictures.net“

Joje galima nustatyti ląstelių skaičiaus anomalijas, tokias kaip: leukocitozė ar leukopenijos, limfocitozė ar limfopenija, neutrofilija ar neutropenija, trombocitozė ar trombocitopenijos ir eozinofilija. Taip pat gali būti matomi ląstelių dydžio ir formos pokyčiai.

Be to, galima nustatyti įvairių tipų anemijas, leukemijas ir bakterines ar kraujo parazitų infekcijas.

Tam yra įvairių rūšių tepinėliai, kurie atliekami atsižvelgiant į tyrimo tikslą. Yra ploni tepinėliai ir stori tepinėliai. Šie tepinėliai skiriasi vykdymo technika ir tyrimo tikslu.

Tie, kuriems yra smulkių lašų, ​​naudojami kaip priedas visam hematologijai. Čia pateikiami duomenys apie leukocitų formulę, be to, analizuojamos trijų ląstelių, sudarančių kraują, formos ir morfologijos: raudonos serijos, baltos serijos ir trombocitai. Nors jie taip pat papildo tirštosios kraujo plėvelės tyrimą.

Storosios plėvelės yra naudojamos diagnozuojant ligas, kurias sukelia hemoparazitai, tokias kaip maliarija ar maliarija, toksoplazmozė, leišmaniozė, Chagos liga, babeziozė ir mikrofilariazė.

Kraujo tepinėlio charakteristikos

Geras kraujo tepinėlis turi atitikti tam tikras savybes. Tarp jų galime paminėti:

- Mėginys turi atitikti būtiniausius kokybės reikalavimus, kad būtų tipiškas.

-Mėginių ėmimas turi būti gerai atliktas.

-Teisinis tepinėlio atlikimas.

-Jeigu atliekamas veninis kraujas, naudokite antikoaguliantą, kuris nedeformuotų ląstelių, ir prieš darydami tepinėlį, sumaišykite mėgintuvėlį.

-Jei tai daroma su kapiliariniu krauju, pirmąjį lašą išmeskite.

-Platėjimas turi būti vienalytis. Tai užtikrina, kad ląstelės pasiskirstytų tolygiai ir kad būtų galima gerai ištirti kraujo ląstelių formą ir skaičių.

- Tepinėlis nuo pradžios iki galo turi būti lygus.

- Tepinėlis turi būti nuo 1 iki 2 mm atstumu nuo stiklelio šonų.

- Tepinio sluoksnio storis nuo pradžios iki galo turėtų palaipsniui mažėti (tepkite smulkiu lašeliu skaidrės metodu).

-Jis turi būti tinkamai paženklintas, kad būtų išvengta painiavos.

- Tinkamai pritvirtinkite ir nudažykite, kad būtų galima aiškiai pastebėti kraujo elementus.

- Prieš dedant preparatą po mikroskopu, tepinėlis turi būti gerai išdžiovintas. Panardindami aliejų ant šlapio tepinėlio, susidarys micelės, kurios neleidžia matyti ląstelių.

Kraujo tepinėlio rūšys

Periferinio kraujo tepinėliai gali būti skirstomi į plonus ir storus. Tie, kurių sluoksnis yra plonas, naudojami leukocitų formulės tyrimams ir kraujo ląstelių morfologiniam stebėjimui. Taip pat galima pastebėti tarpląstelines bakterijas, tokias kaip borrelija, ir tarpląstelinius hemoparazitus, tokius kaip plazmodis.

Smulkiuose blobuose galima atpažinti parazito rūšis, todėl tai yra specifiškesnė technika nei storasis blobas, tačiau storasis blobas yra jautresnis, nes tai yra koncentracijos technika, naudojama išsamiam tarpląstelinių hemoparazitų paieškai.

Yra dviejų rūšių smulkaus lašo tepinėliai: tie, kurie atliekami ant skaidrių, ir tie, kurie atliekami ant dangtelių. Storieji tepinėliai atliekami skaidrėse.

Kraujo mėginių paėmimo būdai

Kraujo tepinėliai gali būti gaminami iš kapiliarų punkcijos arba veninio mėginio, paimto naudojant antikoaguliantą. Jei jis atliekamas iš kraujo naudojant antikoaguliantą, tepinėlį galima paruošti per 2 valandas po mėginio paėmimo.

Reikia atsargiai vartoti antikoaguliantus, kurie nedeformuoja kraujo ląstelių. Geriausias variantas yra EDTA. Priešingai, reikėtų vengti antikoaguliantų, tokių kaip trinatrio citratas.

Jei mėginys paimamas kapiliarų punkcija, tepinėlis turėtų būti nedelsiant pratęstas, prieš kraujo krešėjimą.

Pirmasis lašas turi būti sunaikintas, kad kitas lašas galėtų savaime išbėgti, kad mėginys nebūtų praskiedžiamas audinių skysčiu. Tai yra labiausiai rekomenduojamas būdas stebėti ląstelių morfologiją, nes kraujyje nėra jokių priedų.

Stebėdami hemoparazitus, Solari ir kt. Savo tyrime padarė išvadą, kad abi metodikos (venipunktūra ir kapiliarai) yra vienodai veiksmingos.

Kraujo paėmimo rūšys: A. Kapiliarinė punkcija. B. Venų punkcija. Šaltinis: A. Flickr.com B. Pxhere.com

Kraujo tepinėlio paruošimo būdai

Kraujo tepinėlis gali būti atliekamas rankiniu būdu ant mikroskopo plokštelių arba ant dangtelio ar skaidrės. Tai įmanoma ir per automatinę įrangą.

-Slidės tepinėlis

Tai yra metodika, dėl kurios lengva valdyti daugumą laboratorijų.

Pipete „Pasteur“ į švaraus stiklelio vieno galo vietą įlašinkite ne labai storą ar labai smulkų kraujo lašą.

Tepinėlis pagamintas naudojant kitą skaidrę su žemės galu. Šlifuotas stiklinis stikliukas statomas statmenai lašo, esančio priešingame gale.

Jis pasviręs 30–45 ° kampu ir slenka link lašo; Palietęs jis linijiškai išsiplečia per žemės skaidrės kraštą ir su pastoviu ir apibrėžtu judesiu lapas grįžta; prieš pasiekdamas galą skaidrė pakeliama.

Tokiu būdu homogeninis sluoksnis pasiskirsto per priėmimo stiklelio paviršių.

Tepinėliui leidžiama išdžiūti. Tada jis pritvirtinamas ir dažomas pageidaujama dėme. Prieš žiūrėdami po mikroskopu, leiskite gerai išdžiūti. Lašelis aliejaus uždedamas ant veido, parodant tepinėlį, ir stebimas po šviesos mikroskopu.

Kraujo tepinėlis ant skaidrės. Viršutinis vaizdas: neputuotas tepinėlis. Apatinis vaizdas: beicuotas tepinėlis. Šaltinis: Coinmac

Ant skaidrių padarytos tepinėlio dalys

Atliekant šio tipo tepinėlį, galima atskirti tris apibrėžtas sritis: galvą, kūną ir uodegą. Galva atitinka tą vietą, kur prasideda tepinėlis, ji yra storiausia ir nėra gerai stebėti.

Kūnas yra centrinė arba tarpinė tepinėlio dalis, tai yra geriausia sritis, kurią galima pastebėti po mikroskopu, nes ten ląstelės pasiskirsto tolygiai ir išsaugoma jų morfologija.

Uodega atitinka paskutinę tepinėlio dalį; čia pasiskirstymas nebėra tolygus, o eritrocitų morfologija linkusi prarasti.

Kokybės kontrolė skaidrių technikoje

Šioje technikoje jis vaidina pagrindinį vaidmenį:

-Plokštelės valymas ir nuriebalinimas: tai garantuoja gerą mėginio paslydimą.

-Lašo dydis: su labai dideliais lašais gaunamas storesnis ir ilgesnis tepinėlis, su labai mažu lašeliu pasklidimas bus trumpesnis ir ypač puikus.

-Paskirtyje taikomas greitis: kuo mažesnis greitis tepinėlis bus plonesnis, tuo didesnis greitis bus storesnis.

- Atlikimo kampas: kuo mažesnis kampas, tuo smulkesnis tepinėlis, tuo didesnis kampas, tuo storesnis.

- Žingsnis ant viršelio

Jis nėra plačiai naudojamas, nes trapios dangtelio apdirbimas yra sudėtingas, tačiau tai turi didelių pranašumų, nes geriau paskirstomos ląstelės visame tepinėlyje.

Viršutinės dangtelio centre dedamas ne labai storas, ne labai smulkus lašas. Tuoj ant jo viršaus uždedamas kitas dangtelis taip, kad abiejų dangtelių viršūnės būtų išsikišusios ir sudarytų žvaigždę.

Lašas savaime pasiskirstys ant abiejų viršelių paviršiaus. Pasibaigus prailginimui, kiekviena skaidrė greitai stumiama į priešingą viena kitos pusę (vieną į dešinę, kitą į kairę).

Technika pateikia du tepinėlius, o ne vieną.

Jie dedami išplatėjus puse į viršų. Išdžiūvęs, jis pritvirtinamas ir dažomas pasirinkta technika. Leiskite išdžiūti. Lašas panardinimo aliejaus dedamas ant mikroskopo stiklelio, tepinėlis dedamas tepinėlio puse žemyn ir žiūrimas po mikroskopu.

Kokybės kontrolė dangtelio technikoje

Norint gauti gerą šios technologijos tepinėlį, svarbu:

-Valymo dangtelių valymas (padeda mėginiui sklandžiai slysti).

-Lašio dydis (turi įtakos tepinėlio storiui).

- greitis, kuriuo atsiskiria dangteliai (daro įtaką sklidimo vienodumui).

-Su automatine įranga

Juos galima atlikti per bet kurią iš šių komandų: „Spinner“ ir „Autoslide“.

„Spinner“ sudaro stiklelio su kraujo lašeliu padėjimas ant specialios centrifugos plokštelės. Mėginys centrifuguojamas dideliu greičiu; tokiu būdu susidaro vienalytis ir smulkus mėginio tepinėlis. Jis neturi mėginio hemolizės galimybės.

„Autoslide“ yra priemonė, mechaniškai atliekanti judesius, kad atliktų tepinėlį ant skaidrių. Taip pat galite sutvarkyti ir nudažyti tepinėlį. Jis netgi gali būti pritaikytas kai kuriems automatiniams hematologiniams skaitikliams.

Storo tepimo technika

Norint ieškoti hemoparazitų, rekomenduojami du tepinėliai: vienas su smulkiu lašeliu, kitas - su storu lašeliu.

Atlikite kapiliarų punkciją, išvalykite pirmąjį lašą. Uždėkite nedidelį lašą ant stiklelio ir sutepkite, kaip paaiškinta anksčiau. Už storo karoliuko uždėkite didelę granulę ant kitos skaidrės ir paskleiskite į 1,55 mm kvadratą. Leiskite dviem tepinėliams išdžiūti.

Tepinėlis dažymas

Giemsa ar Wright dėmes, be kita ko, galima naudoti smulkiems lašams. Giemsa arba May-Žalgiris Giemsa dėmę rekomenduojama naudoti esant storiems tepinėliams.

Giemsa dėmė

Tepinėlis 3 minutes fiksuojamas metanoliu, nusausinamas ir vėl leidžiamas išdžiūti. Tada tepinėlis 10-15 minučių padengiamas „Giemsa“ dėme. Jis plaunamas distiliuotu vandeniu ir paliekamas išdžiūti. Stebėti po mikroskopu įlašinamas lašas panardinimo aliejaus.

Wrighto dėmė

Tepinėlis 5 minutes padengiamas Wright dėme. Išmeskite ir uždėkite buferinį tirpalą, kurio pH 6,8, 6 minutes. Venkite mišinio homogenizuoti. Nuplaukite distiliuotu vandeniu ir leiskite išdžiūti. Stebėkite po mikroskopu.

Defektų tipai

Tai pasireiškia praktikantiems atliekant smulkių lašų techniką su skaidrėmis.

Tepinėlis su skirtingo storio plonais (plonais ir storais tarpais)

Taip yra todėl, kad sklidimo metu atliktas judėjimas nebuvo pastovus, todėl jis sustojo ir vėl pradėjo veikti.

Labai trumpas tepinėlio tepinėlis

Jie turi 2 priežastis: viena iš jų yra dėl to, kad žemės šlaitas buvo pakeltas prieš pasiekiant kitą skaidrės galą. Šiuo atveju jis yra ypač storas ir trumpas.

Kita vertus, jei tepinėlis yra trumpas, bet plonas, taip yra todėl, kad lašas buvo labai mažas.

Tepkite tepinėliu tepinėlio galo link

Tai lemia kelios priežastys: viena yra ta, kad žemės kraštas yra sugedęs, kad slėgio, kurį daro priimančioji stiklelė, skleidimo metu padidėja arba kad nusidėvėjęs žemės paviršiaus kraštas.

Tepkite susidarius vakuolėms ar aiškiai užapvalintais ar elipsės formos ploteliais

Jie atsiranda dėl riebių tepinėlių (blogai nuplaunamų ir nuriebalintų).

Labai stori arba labai ploni tepinėliai

Per dideli lašai suteiks labai storus tepinėlius nuo pradžios iki galo, o labai maži lašai suteiks labai smulkius tepinėlius.

Histologija

Kraujo ląstelėse galima pamatyti kraujo tepinėlį. Tarp jų yra:

- Eritrocitai arba raudonieji kraujo kūneliai

Žmogaus kraujas, eritrocitai arba raudonieji kraujo kūneliai ir du leukocitai. Paimta ir redaguota iš: „Viascos“. Jūsų pastebėjimas yra nepaprastai svarbus. Šiame lygyje galima nustatyti anemijas, talasemiją, kaulų čiulpų ligas ir kt.

Eritrocitų arba raudonųjų kraujo kūnelių skaičius yra maždaug 5 x 10 ⁶ mm3 vyrams ir 4,5 x 10 ⁶ moterims. Raudonieji kraujo kūneliai yra panašūs į abipusiai įdubusius diskus, turinčius centrinę fiziologinę blyškumą. Jie gali būti matomi atskirai (normalūs) arba formuojantys rouleaux krūvas (nenormalūs).

Tepinėliuose taip pat pasireiškia poikilocitozė (įvairių formų raudonieji kraujo kūneliai), anizocitozė (įvairaus dydžio raudonieji kraujo kūneliai), anizopoikilocitozė (įvairių formų ir dydžių), anisochromija (skirtingų spalvų), eritroblastai (nesubrendę raudonieji kraujo kūneliai), mikrocitozė (mažesni raudonieji kraujo kūneliai). ) ir makrocitai (didesni eritrocitai).

Kai jiems trūksta hemoglobino ir padidėja centrinis blyškumas, sakoma, kad yra hipochromija. Pastebėjus normalią raudoną seriją, ji bus nurodoma kaip normocitinė ir normochrominė.

-Baltųjų kraujo kūnelių arba leukocitų

baltieji kraujo kūneliai

Įprastas kiekis svyruoja nuo 5000 iki 10 000 mm ³ . Jie keičiasi infekciniuose procesuose, alergijose ir leukemijoje. Kraujo tepinėlyje galima išskirti keletą tipų, kurie paaiškinami žemiau.

Segmentiniai neutrofilai

Jie sudaro 55–65% visų leukocitų. Jie matuoja nuo 10-15 μm. Jie turi segmentą arba skilties branduolį, kuris priima skirtingas morfologijas, todėl jis vadinamas polimorfonukleariniu.

Jų citoplazmoje yra gausu neutrofilų granulių ir kai kurių azurofilų. Jų padaugėja dėl bakterinių infekcijų (neutrofilija), sumažėja virusinių infekcijų (neutropenija).

Gali būti stebimi tokie morfologiniai anomalijos kaip pleokariocitozė (hiper segmentiniai branduoliai), arkos (nesubrendusios ląstelės) ar makropolitikai (ovalios formos ir dideli).

Kiti pakeitimai:

-Toksinės granulės

-Pseudo Pelgerio neutrofilai (branduolyje nėra lobuliacijų arba jie yra išsipūtę).

-Döhle kūnai: tamsiai mėlyni citoplazminiai intarpai.

-Padidėjusi citoplazminė bazofilija.

-Iracitoplazminiai vakuumai.

- Ląstelinė piknozė (branduolinių tiltelių praradimas).

Segmentiniai eozinofilai

Jie sudaro 1–3% visų baltųjų kraujo kūnelių. Jie matuoja 9-10 μm. Joms būdinga gausios acidofilinės citoplazmos granulės ir nedaug azurofilų. Jo branduolys turi dvi lobuliacijas. Jų skaičius padidėja sergant alergija ir parazitinės kilmės ligomis.

Segmentiniai basofilai

Jie yra labai reti, sudaro 0–1% leukocitų. Jie matuoja 10-12μm. Branduolys paprastai yra netaisyklingas pakraščiuose ir gali būti neryškus, tačiau jo nematyti dėl daugybės bazofilinių šiurkščiavilnių granulių citoplazmoje. Labai retai galima pastebėti bazofiliją.

Limfocitai

Tai yra mažos ląstelės, turinčios bazofilinę citoplazmą, turinčios branduolį, tiksliai apibrėžtą, apvalią, su kondensuotu chromatinu. Branduolys apima beveik visą ląstelę. Jie sudaro 26–40% kraujo leukocitų. Jų padaugėja virusinių infekcijų metu (limfocitozė). Galima pamatyti reaktyvius limfocitus.

Monocitai

Ląstelės didesnės nei limfocitai, su didesne citoplazma ir laisvesniais, ovaliais chromatino branduoliais. Jie matuoja 9–12μm. Citoplazma yra gausi ir paprastai būna šviesiai pilkšvai mėlyna, naudojant įprastus dažymo būdus. Tarp pakitimų gali būti stebimi vakuuliuoti monocitai ir monocitozė.

-Plokštės

Jie matuoja nuo 1,5-3 μm. Jos forma yra apvali arba ovali. Normalioji vertė svyruoja nuo 150 000 iki 350 000 trombocitų / mm3. Jie gali sumažėti sergant kai kuriomis virusinėmis infekcijomis. Jie neturi branduolio ir yra purpurinės spalvos. Šioje serijoje gali būti anomalijų, tokių kaip makro arba mikro trombocitai, trombocitozė ar trombocitopenija ir trombocitų fragmentai.

Patologiniai elementai

Kraujo parazitai

Kraujo tepinėliuose gali būti hemoparazitų, tokių kaip maliarijos ar maliarijos sukėlėjas (Plasmodium genties parazitai). Dėl šios priežasties svarbu tepinėlį analizuoti rankiniu būdu, nes automatizuota įranga praleidžia šį atradimą.

Bakterijos

Esant tokioms patologijoms kaip recidyvuojantis karščiavimas ar Laimo liga, galima pastebėti jos sukėlėją. Šiuo atveju tai atitinka Borrelia recurrenti spirochetes ir Borrelia burgdorferi kraujo tepinėlį.

Nesubrendusios ląstelės

Sunkiais atvejais stebima leukemija, leukemoidinės ir leukoeritroblastinės reakcijos. Bakterinių infekcijų metu gali būti nežymių nukrypimų į kairę (sukčių buvimas). Eritroblastai taip pat gali būti pastebimi kai kuriose anemijose.

Nuorodos

1. Kraujas ir kraujodaros audiniai. Galima rasti: sld.cu
2. Gomezas A, Casas M. 2014. Angelas. Klinikinė laboratorinė interpretacija. 8-asis leidimas. Redakcija Médica Panamericana.
3. Solari Soto L, Soto Tarazona A, Mendoza Requena D, Llanos Accounts A. Parazito tankio palyginimas storo veninio kraujo laše ir akupresūra palyginus diagnozuojant maliarijos vivax. Rev Med Hered 2002; 13 (4): 140–143. Galima rasti: scielo.org.
4. Terry Leonardas Nelsonas, Mendoza Hernández Carlos. Periferinio kraujo tepinėlio tyrimo svarba senyvo amžiaus žmonėms. „Medisur 2017“; 15 (3): 362–382. Galima rasti: scielo.sld
5. Grinspanas S. Periferinio kraujo tepinėlio tyrimas. Tęstinis medicininis išsilavinimas. Galima rasti: bvs.hn/RMH