MAISTINIS AGARAS: PAGRINDIMAS, PARUOŠIMAS IR PANAUDOJIMAS - BIOLOGIJA - 2025

Maistinių agaro yra neselektyvūs vidutinio ir ne skirtumas kietas kultūra. Šioje terpėje auga visų rūšių bakterijos, kurios nėra reiklios mitybos požiūriu.

Tai yra paprasta terpė ir, nepaisant savo pavadinimo, turi mažesnę maistinę vertę, palyginti su kitomis panašiomis terpėmis, tokiomis kaip smegenų širdies infuzijos agaras ar Trypticase sojos agaras.

Kolonijų skaičius maistiniame agare

Jo naudingumas laboratorijoje yra labai įvairus. Daugiausia jis naudojamas sub-kultūrų rūšims auginti, kamienams palaikyti, kolonijoms skaičiuoti, kaip pagrindas, be kita ko, ruošiant kraujo agarą.

Panašiai dėl šviesiai smėlio spalvos gali būti išskirtas kai kurių bakterijų kamienų pagamintų pigmentų, tokių kaip žalsvas Pseudomonas aeruginosa, pigmentas, serratia marcescens, pagamintas kambario temperatūroje, geltonas pigmentas, Staphylococcus, pigmentas. aureus, be kita ko.

Be to, tai viena pigiausių augančių terpių, aptinkamų rinkoje.

Pagrindas

Kaip jau minėta aukščiau, tai yra labai paprasta terpė, kuri be apribojimų ir be sudėtingų interpretacijų teikia maistines medžiagas bakterijoms augti.

Kadangi terpė yra permatoma, ji yra ideali kolonijoms skaičiuoti gylio sėjimo metodu.

Sudėtis

Jį daugiausia sudaro mėsos ekstraktas arba mielių ekstraktas, peptonai arba kasos želatinos virškiklis, agaro agaras, natrio chloridas ir distiliuotas vanduo.

Mėsos ar mielių ekstraktas ir peptonai yra svarbiausi anglies ir mineralų (azoto, fosforo ir sieros) šaltiniai, kuriuos bakterijos naudos kaip energijos ir augimo veiksnių šaltinį.

Be to, agaras-agaras yra visų kietų terpių pagrindas, pakeičiantis želatiną, kuri buvo pirmasis Robert Koch naudojamas bazinis junginys, kad jo terpė būtų vientisa.

Agaras yra polisacharidas, sudarytas iš galaktozės, galaktomanano, agarozės ir agaropektino. Jis nusistovi ties 40 ° C ir ištirpsta beveik 100 ° C.

Natrio chloridas savo ruožtu suteikia terpėms osmosinį pobūdį, reikalingą bakterijų vystymuisi.

Galiausiai vanduo naudojamas liofilizuotų junginių hidratacijai ir ištirpinimui. Turi būti naudojamas distiliuotas vanduo, kurio pH yra neutralus. Vanduo iš čiaupo neturėtų būti naudojamas, nes jame yra kalcio ir magnio, kurie gali reaguoti su terpėje esančiais fosfatais ir sudaryti netirpias druskas.

Paruošimas

Vienam litrui maistinio agaro reikia pasverti 31 g dehidratuotos terpės. Įpilkite į kolbą ir ištirpinkite litre distiliuoto vandens. Po 5 minučių stovėjimo kaitinkite ant šilumos šaltinio ir nuolat maišykite, kol virins 1 arba 2 minutes.

Mitybinės terpės paruošimas.

Tada kolba dedama į autoklavą ir 20 minučių sterilizuojama 121 ° C temperatūroje.

Sterilizacija autoklave

Pasibaigus laikui, jis išimamas iš autoklavo ir patiekiamas steriliuose Petri induose, naudojant laminarinio srauto gaubtą arba Bunseno degiklį.

Jei Petri indai yra vienkartiniai (plastikiniai), terpė turi būti paskirstoma, kai agaro temperatūra yra maždaug 50 ° C, kad jie per daug karščio nedeformuotųsi.

Leiskite sukietėti ir laikykite ant apverstos plokštelės laikiklio ir iki naudojimo atšaldykite 2–8 ° C temperatūroje.

Prieš sėjant plokštes, jos turi būti grūdintos. Maistinės agaro lėkštelės neturėtų būti naudojamos, jei jos yra užterštos ar dehidratuotos.

Paruoštos terpės pH turi būti sureguliuotas iki 7,3 ± 0,2.

Programos

Tai pati paprasčiausia terpė, naudojama mikrobiologijos laboratorijoje. Jo sudėtis puikiai tinka dauginti nereikalingas bakterijas.

Pagrindiniai jo naudojimo būdai paaiškinti žemiau:

Kaip pagrindas paruošti kraujo agarą

Ši terpė kartais naudojama kaip pagrindas ruošiant agarą, tačiau tai nėra dažniausiai naudojama bazė.

Skatinkite sporų formavimo bakterijų sporuliaciją

Ši mitybinė terpė yra ypač naudinga sporų formavimo bakterijų, tokių kaip Bacillus sp.

Tam pasėjama Bacillus genties padermė ir 24 valandas inkubuojama aerobiozės metu 37 ° C temperatūroje. Kai kolonijos užauga, plokštelė patiria temperatūrą, tai yra, krosnies temperatūra padidinama iki 44 ° C ir paliekama dar 24 valandoms arba įdedama į šaldytuvą 24 valandoms.

Pasibaigus laikui, kultūros tepinėliai pasidaro ir dažomi „Gram“ arba „Shaeffer-Fulton“ sporų dažais. Juose bus stebimos bacilos su endosporomis (sporomis bacilos viduje) ir egzosporomis (sporomis už bacilos ribų).

Deformacijų priežiūra

Kai kurios mokslinių tyrimų ar universitetų mokymo laboratorijos reikalauja kuo ilgiau palaikyti kliniškai svarbias gyvybingas bakterijas, kad būtų galima naudoti bakterijų banką (bakterioteka) mokslinių tyrimų darbui ar mokymo praktikos rengimui, kai Studentai išmoks manipuliuoti ir atpažinti šiuos mikroorganizmus.

Tam gali būti naudojamas maistinis agaras, taip pat smegenų širdies infuzijos agaras. Paruoštas agaras supilamas į mėgintuvėlius su bakelito dangteliu ir palenkiamas ant pagrindo taip, kad agaras sukietėtų, sudarydamas bloką apačioje ir kūgį paviršiuje (fleitos snapas).

Kiekvienas mėgintuvėlis yra pažymėtas bakterijų, kurios turi būti pasėtos, pavadinimu ir data. Kiekviena bakterija bus pasėjama ant kūgio formos ir inkubuojama 24 valandas, kol kolonijos išaugs, mėgintuvėliai bus laikomi kambario temperatūroje.

Bakterioteka turi būti atnaujinta nuo 1 iki 3 mėnesių, kad būtų išvengta teršalo užteršimo ir dehidratacijos bei bakterijų žūties.

Tokiu būdu gali būti palaikomos tik nerinktos bakterijos.

Kolonijų skaičius

Nors yra specialių kolonijų skaičiavimo būdų, tokių kaip standartinis agaras, maistinis agaras gali būti naudojamas šiam tikslui - sėjant paviršiumi drigalski mentele arba gyliu. Dėl šios priežasties jis yra labai naudingas atliekant mikrobiologinę maisto ir vandens analizę.

Veikia diagnostiniai testai

Kadangi tai terpė, kurioje nėra kraujo ar kitų priedų, idealu atlikti šioje terpėje užaugintas kolonijas, kad būtų galima atlikti katalazės testą.

Taip pat dėl ​​savo šviesios spalvos nurodoma, kad oksidazės bandymai turi būti atliekami tiesiai į agaro plotą be jokių trukdžių.

Mezofilinių aerobų atsigavimas iš pramoginių druskingų vandenų (paplūdimiai)

Maistinis agaras, paruoštas su 10% jūros vandens, yra naudingas mezofiliniams aerobams paplūdimio vandenyje įvertinti.

Tokiu būdu galima įvertinti tikrąjį vandens užteršimo šiais mikroorganizmais lygį, nes naudojant tokio tipo mėginius, naudojant įprastinėmis kultūrinėmis terpėmis, rezultatai sutampa.

Tai parodė Cortez ir kt. 2013 m. vykdant tiriamąjį darbą.

Tai galima paaiškinti dėl staigių pokyčių, kuriuos patiria bakterijos, eidamos iš padidintos druskos aplinkos į mažai druskos turinčią aplinką, todėl mikroorganizmai patenka į letargijos būseną, kurioje jie yra gyvybingi, bet nėra kultivuojami.

Nuorodos

1. "Maistinis agaras". Vikipedija, nemokama enciklopedija. 2016 rugsėjo 13, 20:33 UTC. 2018 12 29, 21:04 en.wikipedia.org
2. „Forbes B“, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey ir Scotto mikrobiologinė diagnozė. 12 red. Argentina. „Panamericana SA“ redakcija
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologinė diagnostika. (5-asis leidimas). Argentina, „Panamericana SA“ redakcija
4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Vandens terpės, paruoštos su jūros vandeniu, poveikis Chichiriviche, Falcono valstijos, Venesuelos, kurortų jūrų vandenyse sveikatos rodikliams. „Rev Soc Ven Microbiol 2013“; 33: 122–128
5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M ir Cardoso M. Mikrobiologinė vandens kokybė dozėms, kiaulėms skirti. Cient.Agro.Amaz. 2013; 1 (2): 42–49.
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Praktinė klinikinė mikrobiologija. Kadiso universitetas, 2-asis leidimas. UCA leidinių tarnyba.