„ Salmonella Shigella “ agaras, dar žinomas kaip SS agaras, yra vidutinio sunkumo selektyvioji ir diferencinė terpė, ypač skirta Salmonella ir Shigella genčių enteropatogeninėms bakterijoms išskirti - abu aplinkos mėginiai, tokie kaip klinikiniai.
SS agaras turi sudėtingą kompoziciją; Jį sudaro mėsos ekstraktas, peptonas, laktozė, tulžies druskos, natrio citratas, natrio tiosulfatas, geležies citratas, agaras, neutralus raudonas, ryškiai žalias ir distiliuotas vanduo. Atsižvelgiant į didelį selektyvumą, galima sėti mėginius, kuriuose gausu mišrios floros.
SS agaras su Salmonella sp. Šaltinis: „Manurx27“, iš „Wikimedia Commons“
Mikrobiologijos laboratorijose Salmonella-Shigella terpė plačiai naudojama tiriant Salmonella ir Shigella buvimą viduriavimo išmatų mėginiuose, nuotekose, geriamajame vandenyje ir maiste.
Kartais Salmonella padermėms atkurti reikia naudoti išankstinio sodrinimo sultinius (laktozės sultinį) ir sodrinimo sultinį (selenito cistino sultinį).
Šie veiksmai yra būtini, kai įtariama, kad salmonelių yra labai mažai, arba kai štamu gali būti piktnaudžiaujama pramoninei gamybai būdingais procesais, daugiausia perdirbtais maisto produktais. Taip pat patartina praturtinti pacientų, gydytų antibiotikais, išmatų mėginius.
Vėliau praturtintą sultinį galima pasėti ant Salmonella-Shigella agaro ir kitų panašių terpių, tokių kaip ksilozės agaras, lizino deoksicholatas (XLD) ir enterinis Hektoen agaras (HE).
Pagrindas
Kiekvienas Salmonella-Shigella kultūrinės terpės komponentas turi specifinę funkciją, o visas mišinys suteikia jai būdingų savybių.
Maitinimo galia
Mėsos ekstraktas ir peptonas (suardomas su kazeinu ir gyvuliniu audiniu) suteikia reikalingų maistinių medžiagų (azoto, anglies ir vitaminų) mikroorganizmų, galinčių toleruoti likusius komponentus, vystymuisi.
Nuoseklumas
Agaras-agaras yra atsakingas už kietos konsistencijos užtikrinimą terpėje.
Atrankinis
Ši terpė yra labai selektyvi, nes joje yra tulžies druskos, natrio citratas ir ryškiai žalia. Todėl jis slopina visų gramteigiamų bakterijų ir daugumos gramneigiamų bakterijų, įskaitant kai kurias koliformas, augimą.
Nors Salmonella genties ir kai kurios Shigella padermės bakterijos palaiko šiuos junginius.
Iš esmės Salmonella gentis yra labai atsparus tulžies druskoms tiek, kad jos gali gyventi kai kurių nešiotojų, nuolat skleidžiančių bakterijas savo išmatose, tulžies pūslėje.
Diferencialas
Laktozė yra fermentuojamas angliavandenis, padedantis atskirti laktozę fermentuojančias padermes nuo nefermentuojančių. Šią savybę įrodo pH indikatoriaus, kuris šioje terpėje yra fenolio raudonas, buvimas.
Fermentuojančios laktozės padermės suteikia raudonas kolonijas, o nefermentuojančios padermės yra bespalvės. Ši savybė yra svarbi, nes Salmonella ir Shigella nefermentuoja laktozės.
Kita vertus, šioje terpėje yra natrio tiosulfato kaip sulfido šaltinio ir geležies citrato kaip geležies šaltinis. Abu junginiai sugeba atskirti bakterijas, galinčias gaminti vandenilio sulfidą. Jie reaguoja sudarydami matomas netirpias juodosios geležies sulfido nuosėdas.
Ši savybė yra kai kuriuose Salmonella genties kamienuose. Paprastai jų kolonijos yra plokščios bespalvės, o centre yra juodas taškas. Likusios salmonelių dalys nesukuria H 2 S ir vystosi kaip bespalvės kolonijos.
Kita vertus, Shigella genties kolonijos yra plokščios bespalvės be juodinimo.
Paruošimas
Šią terpę paruošti labai paprasta.
Pasverkite 63 g dehidratuotos komercinės terpės ir ištirpinkite litre distiliuoto vandens. Šildykite tirpalą ir išmaišykite. Mišinys gali virti iki kelių minučių.
Ši terpė neturi būti autoklavuota. Ištirpęs jis patiekiamas tiesiai ant vienkartinių arba dvigubų sterilių plokštelių.
Kai jie sukietėja, jie išdėstomi apverstu būdu ant trombocitų ir iki naudojimo laikomi šaldytuve (2–8 ° C).
Paruoštos terpės pH turėtų išlikti 7,2 ± 0,2, o jos spalva turėtų būti oranžinės raudonos.
Prieš sėjant mėginius, svarbu leisti plokštelėms sušilti. Originalų mėginį galima sėti tiesiai, išpilant medžiagą į agaro dalį ir iš ten tepant.
Jei naudojate praturtintus sultinius, praleiskite dalį selenito sultinio ir sėkite su drigalski mentele.
Inkubuokite aerobiozėje 24 valandas 37 ° C temperatūroje.
Atminkite, kad sveriamų gramų skaičius ir galutinis terpės pH kiekviename komerciniame name gali skirtis. Vidurinė bazė visada nurodo jos paruošimo nurodymus.
Naudokite
Jis dažnai naudojamas analizuojant išmatų kultūrą ir atliekant mikrobiologinius nuotekų, geriamojo vandens ir maisto mėginių tyrimus.
Dažnai ruošiamos dvigubos plokštelės, vienoje pusėje dedamas Salmonella-Shigella agaras, o kitoje - XLD agaras.
Apribojimai
- Kai kurios Shigella padermės šioje terpėje neauga. Todėl nerekomenduojama pirminio šios genties išskyrimo.
- Ne kiekviena permatoma kolonija su juodu centru rodo Salmonella; Norint teisingai identifikuoti, reikia atlikti biocheminius tyrimus, nes kai kurių „Proteus“ padermių kolonijos nesiskiria nuo salmonelių.
- Dehidratuota terpė turi rūpintis aplinkos poveikiu, nes ji yra labai higroskopiška. Todėl jis turi būti laikomas sausoje ir gerai uždaroje aplinkoje. Atidaroma labai trumpą laiką.
- Laikui bėgant, terpėje esančios tulžies druskos gali susikaupti, o agare susidaro vaizdas, panašus į kilimėlį, tačiau tai neturi įtakos rezultatams.
- Kai kurios „Shigella“ padermės gali lėtai fermentuoti laktozę.
QA
Norint įrodyti, kad terpė veikia tinkamai, patartina sodinti žinomus ar sertifikuotus kontrolinius štamus ir stebėti, ar augimas atitinka numatytas savybes.
Tam galima naudoti E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium ar Enterococcus faecalis padermes.
Laukiami rezultatai:
Enterobakteriai ir Klebsiella ------ didelės kolonijos ir raudoni ar rausvi mucoidai.
Shigella flexneri ---------- skaidrios arba bespalvės plokščios kolonijos.
Salmonella typhimurium ------ bespalvės kolonijos su juodais centrais.
Enterococcus faecalis -------- visiškas slopinimas.
Nuorodos
- „Difco Francisco Soria Melguizo“ laboratorijos. Salmonella-Shigella agaras. 2009. Prieinamas adresu: f-soria.es
- BD laboratorija. BD Salmonella-Shigella agaras. 2013.Atsiejama: bd.com
- „Britannia“ laboratorijos. Salmonella-Shigella agaras. 2015.Atsiejama: britanialab.com
- „Valtek“ diagnostika. Salmonella-Shigella agaras (SS agaras), 2010 m. Galima rasti: andinamedica.com
- „Forbes B“, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey ir Scotto mikrobiologinė diagnozė. 12 red. Redakcija Panamericana SA Argentina.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologinė diagnostika. 5-asis leidimas Redakcija Panamericana SA Argentina.