BAKTERIOLOGINĖ KILPA: CHARAKTERISTIKOS, TIPAI, PANAUDOJIMAS - BIOLOGIJA - 2025

Bakteriologinį kilpa yra darbo naudojama priemonė mikrobiologams už mikrobų kultūroms (bakterijų arba grybų) sėjos. Tai turbūt labiausiai šių profesionalų naudojama priemonė.

Jo naudojimas atrodo paprastas, tačiau iš tikrųjų tam reikia daug mokymų. Prieš pradedant sėją, kilpa turi būti sterilizuota Bunseno degiklyje, tada paimama mikrobinė sėjimo kultūra, kuri gali kilti iš skystos kultūros arba kietos kultūros.

Bakteriologinių kilpų tipai. Šaltinis: nepateiktas mašininio skaitymo autorius. Umed や お daroma prielaida (remiantis autorių teisių paraiškomis).

Paėmus sėjimo kultą, jis gali būti dedamas į skystą terpę arba sėjamas į kietą terpę. Po kiekvienos procedūros kilpa vėl sterilizuojama. Rankena taip pat tinkama mikrobų tepinėliams gaminti ant stiklelio.

Bakteriologinė kilpa turi daugybę pavadinimų, tarp kurių galime paminėti: platinos kilpa ar kilpa, inokuliavimo kilpa ar sėjimo kilpa, tačiau tikrasis jos pavadinimas yra Kohle kilpa.

Medžiaga, su kuria pagaminta rankena, paprastai yra nikelio-chromo (nichromo) lydinys arba platina. Kita rinkoje esanti įvairovė yra plastikinės vienkartinės bakteriologinės kilpos.

Kita vertus, yra keletas bakteriologinių kilpų tipų, kiekviena iš jų atlieka funkciją pagal užduotis, kurias atlieka mikrobiologas. Rankenos pasirinkimas priklausys nuo to, ką reikia padaryti.

Pavyzdžiui, norint atlikti striatumą išeikvojus, kad būtų galima išskirti mikroorganizmą, naudojama platinos kilpa, kuri baigiasi uždaru žiedu, nepriklausomai nuo to, ar ji kalibruota, ar ne.

Kadangi norint sėti šlapimo mėginį, kur svarbu įvertinti KSV, reikia naudoti kalibruotą kilpą. Taip pat adatos kilpa yra būtina norint pasėti biocheminius tyrimus, kuriuos reikia sėti pradūrus. Svarbu, kad rankeną prižiūrėtų apmokytas personalas.

charakteristikos

Bakteriologinės kilpos sudarytos iš dviejų kraštutinumų. Vienas galas atitinka rankeną arba pagrindą, o kitas - pati rankena.

Rankenos pagrindas arba rankena

Pagrindas skirtas rankenai sugriebti tvarkant. Paprastai jis yra metalinis, tačiau turi šilumos izoliatorių, kuris apsaugo operatorių nuo deginimo, kai rankenos galas yra sterilizuojamas ant žiebtuvėlio. Jos ilgis yra maždaug 20 cm, nors ji gali būti ir ilgesnė. Jame yra sriegis rankenai sureguliuoti.

Rankena

Tai yra funkcinis galas, tai yra ta dalis, kuri liečiasi su mikroorganizmais ir kultūrine terpe. Jį sudaro plona viela, įkišta į pagrindą.

Rankena gali būti pagaminta iš nichromo arba platinos, todėl ji kartais vadinama platinos rankena. Jis yra maždaug 6,5 cm ilgio ir maždaug 0,20 mm pločio. Rankena su rankena gali išmatuoti 26,5 cm. Matavimai gali skirtis priklausomai nuo gamintojo.

Tipai

Yra keletas bakteriologinių kilpų tipų ir kiekviena jų yra specialiai naudojama. Rankenų tipai yra šie: kalibruota žiedo formos rankena, nekalibruota žiedo formos rankena, tiesi ar adatinė rankena, mentelei skirta rankena, „L“ formos rankena ir aštrios formos rankena.

Kita vertus, rankenos gali būti nuolatinės arba vienkartinės. Nuolatiniam naudojimui sterilizuojami žiebtuvėlyje, yra daugkartinio naudojimo ir labai patvarūs. Nors vienkartiniai gaminiai yra sterilūs iš gamyklos, jie naudojami tik vieną kartą ir yra išmetami.

Programos

Žiedo rankena, nekalibruota

Tai yra labiausiai naudojama rankena mikrobiologijos laboratorijoje. Jis naudojamas iš mikrobinės suspensijos (skystos terpės) arba kolonijos dalies (kietos terpės) pasėti, kad būtų pasėtas į kitą auginimo terpę - biocheminį bandymą arba, atsižvelgiant į atvejį, labiau praturtintą ar selektyvią terpę. Tai taip pat naudinga gaminant mikrobinius tepinėlius ant stiklelio.

Naudojant tokio tipo kilpas, pradinis sėjimo intarpas gali būti dryžuotas. Jis taip pat suprojektuotas taip, kad sklandžiai slystų ant agaro, jo nepažeisdamas. Be abejo, tam reikia, kad apmokyti darbuotojai dirbtų su sėjos technika, taikydami teisingą jėgą ir judesius, kad būtų gera strija.

Su šia rankena galima atlikti įvairius sėjos būdus. Pvz., Kieta terpė Petri lėkštelėse paprastai pasėjama išsekimo būdu (yra keletas metodų, žr. 1 vaizdo įrašą).

Šis metodas skirtas izoliuotoms kolonijoms gauti, norint jas ištirti ir identifikuoti, ypač kai mėginys yra polimikrobinis, tai yra, kultūra nėra gryna (joje yra daugiau nei vienos rūšies mikroorganizmai).

Vietoj to, pleištai sodinami į paprastą zigzagą, kad būtų gauta bakterijų masė, tokiu atveju nebūtina išskirti kolonijų.

Kartais jie taip pat naudojami paimti tam tikrus mėginius. Pavyzdžiui, Rojas ir kt. Naudojo bakteriologinę kilpą surinktų makšties audinių mėginiams iš žiurkių.

Bakteriologinė kilpa su žiedo antgaliu, nekalibruota. Šaltinis: Pixinio.com

Žiedo formos rankena, kalibruota

Ši rankena, kaip rodo jos pavadinimas, yra sukalibruota tam, kad paimtų tam tikrą kiekį mikrobų suspensijos. Jis naudojamas, kai reikia, kad pasėlis atitiktų tai, kas yra standartizuota šioje srityje.

Pvz., Labai įprasta sodinti šlapimo kultūras. Tokiu atveju galima naudoti 0,01 ml ir 0,001 ml kalibruotą kilpą.

Reikėtų pažymėti, kad kalibruotos rankenos turi paklaidą, kuri skiriasi priklausomai nuo mėginio paėmimo kampo ir talpyklos burnos dydžio.

Jei 0,001 ml kilpa įkišama vertikaliai į indą su maža burna (≤ 7 mm), paimamas kiekis bus 50% mažesnis nei norėta.

Taip nutinka todėl, kad kuo mažesnis konteinerio burnos skersmuo, tuo didesnis paviršiaus įtempis, todėl padidėja sukibimo jėgos tarp (stiklas - skystis). Dėl to rankenos sunaudotas skysčio krūvis yra mažesnis.

Tuo tarpu, jei jis imamas 45 ° kampu konteineryje su plačia burna (≥ 22 mm), jis gali surinkti 150% daugiau nei reikalaujama. Tokiu atveju paviršiaus įtempis yra mažesnis, stiklo / plastiko sanglaudos jėgos mažėja, o skysčio-skysčio sanglaudos jėga didėja.

Dėl to, kas išdėstyta pirmiau, šlapimo kultūroms kartais rekomenduojama naudoti kitus kolonijas sudarančių vienetų kiekybinio įvertinimo metodus.

Tiesi ar adatinė rankena

Jis taip pat vadinamas sriegine rankena. Jis naudojamas inokuliuoti tam tikrus biocheminius bandymus, ypač tuos, kuriuos reikia pasėti punkcijos metodu. Pusiau kietos terpės, paruoštos kaip blokas, pavyzdys, pavyzdžiui: SIM, MIO ir O / F terpė.

Be to, MIO ir SIM, kurie vertina judrumą, atveju svarbu, kad punkcija būtų atliekama adatos kilpa, nes teigiamas judrumas aiškinamas, kai bakterijos auga link pradinio užkrato šonų.

Bandymas, užkrėstas kilpos kilpa, gali suklastoti rezultatus (klaidingai teigiamas). Dėl šios priežasties atliekant tokio tipo sėjimą reikia pasirūpinti, kad punkcija būtų unikali, o pašalinus ji išeitų ta pačia kryptimi, kuria įvesta.

Kitas testas, į kurį adata turi būti sėjama, net jei jis yra paruoštas pleišto pavidalu, yra „Kligler“. Atliekant šį bandymą nerekomenduojama, kad deguonis prasiskverbtų giliai į agarą, nes tam tikroms cheminėms reakcijoms vykti reikalinga deguonies neturinti terpė. Ši rankena taip pat naudojama palietus konkrečią koloniją subkultūros tikslais.

Mentele rankena

Dauguma mikroorganizmų sukuria minkštas, lengvai supjaustomas kolonijas. Tačiau yra keletas mikrobų sukėlėjų, kurių kolonijos yra kietos ir sausos, pavyzdžiui, apskritai mikobakterijos ir kai kurie grybeliai. Tokiais atvejais naudinga naudoti mentelės rankeną.

"L" formos rankena

Dažniausiai naudojamas grybinių kultūrų, ypač pelėsių, kultas.

Aštrios galiuko rankena

Naudinga imti labai mažas kolonijas, esančias polimikrobinėse kultūrose, kad būtų galima jas subkultūruoti.

Sėjos technika

1 vaizdo įrašas

Platinos rankenos sterilizavimas

Rankena turi būti sterilizuota prieš ir po naudojimo. Norėdami sterilizuoti žiebtuvėlio bakteriologinę kilpą, atlikite šiuos veiksmus: rankena turėtų būti dedama viršutinėje liepsnos dalyje, kiek įmanoma vertikaliau, kad ji būtų sterilizuojama nuo galo į viršų.

Kai smulkus siūlas pasidaro ryškiai raudonas, galima sakyti, kad jis yra sterilus. Norėdami jį naudoti, jis atšaldomas ir imamas pasirinktas mėginys. (Žr. 2 vaizdo įrašą).

Bakteriologinės kilpos sterilizavimas

2 vaizdo įrašas

Nuorodos

1. „Bakteriologinė kilpa“, Vikipedija, nemokama enciklopedija. 2019 m. Liepos 23 d., 13:31 UTC. 2019 m. Rugpjūčio 18 d., 22:45. Vikipedija.
2. Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Kalibruotos metalinės rankenos mikrobiologams: nacionalinės gamybos alternatyva. Soc., Ateik. Mikrobiolis. 2010; 30 (1): 37–42. Galima rasti: ve.scielo.org
3. „Forbes B“, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey ir Scotto mikrobiologinė diagnozė. 12 red. Redakcija Panamericana SA Argentina.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologinė diagnostika. 5-asis leidimas Redakcija Panamericana SA Argentina.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F ir kt. Eupatorium arsenei gėlių heksano ekstrakto analgezinio poveikio nustatymas žiurkių ūmaus skausmo modelyje. mex. mokslas. ūkis. 2015; 46 (1): 64–69. Galima rasti: scielo.org