LACTOPHENOL BLUE: SAVYBĖS, SUDĖTIS, PARUOŠIMAS, PANAUDOJIMAS - CHEMIJA - 2025

Lactophenol mėlyna arba mėlyna medvilnės yra paruošiamas su vienu dažų savybių. Jis naudojamas klinikinėse laboratorijose daugiausia grybelinėms struktūroms, tokioms kaip hifai, gemalo vamzdeliai ir sporos, dažyti.

Tai padeda numatant ar preliminarią tam tikrų grybų diagnozę, tačiau visada patariama diagnozę sustiprinti atliekant konkretesnius testus, tokius kaip biocheminiai ar serologiniai tyrimai.

Grafinis laktofenolio mėlynos spalvos dėmės, tepinėlio, dažyto laktofenolio mėlyna spalva, pavaizdavimas mikroskopu. Šaltinis: public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8

Lakofenolio mėlyną sudaro pieno rūgštis, mėlynasis anilinas, glicerinas, fenolis ir dejonizuotas vanduo. Jis gali būti paruoštas laboratorijoje arba gali būti įsigytas paruoštas naudoti. Paruoštas naudoti jis jokiu būdu neturėtų būti praskiedžiamas, nes šis veiksmas duos baisių rezultatų.

Dėl jo komponentų koncentracijos jis idealiai tinka dažyti grybelines struktūras, nes fenolis pašalina lydinčią bakterijų mikrobiotą, o pieno rūgštis sukuria apsauginę plėvelę aplink grybelio struktūrą. Galiausiai, mėlynasis anilinas turi prieraišumą laikytis grybelio struktūrų.

Pagrindas

Su laktofenolio mėlyna spalva atliekamas tam tikros mikologinės kultūros grybelinių struktūrų dažymas. Jis vadinamas paprastu, nes naudojamas tik vienas dažiklis.

Lakofenolio mėlynasis, be dažymo, taip pat veikia kaip mėginio skaidrintuvas dėl bendro pieno rūgšties ir fenolio veikimo. Be to, fenolis veikia kaip šarmas ir tuo pat metu neleidžia mikroorganizmui lizės, nes slopina hidrolizinius fermentus, kurie gali būti.

Pieno rūgštis išsaugo grybelio struktūrų morfologiją.

Kita vertus, mėlynasis anilinas turi savybę prilipti arba prisijungti prie chitino turinčių struktūrų. Konstrukcijos dažytos šviesiai mėlyna spalva.

Reikėtų pažymėti, kad grybelinių mikroorganizmų, ypač pelėsių, ląstelių sienelėse yra chitino, todėl šis dažiklis yra idealus šių mikroorganizmų dažymui.

charakteristikos

Lakofenolio mėlynasis tirpalas yra stipriai rūgštus, šiek tiek drumstas, šviesiai mėlynos spalvos vandeninis dažiklis. Jis išlieka stabilus, jei laikomas 15–25 ° C temperatūroje. Butelis turi būti tinkamai uždarytas. Tai dirgina ir ėsdina odą bei gleivines.

Sudėtis

Vieno litro mėlynojo laktofenolio paruošimo formulė yra tokia:

–250 g / l pieno rūgšties

-1,0 g / L anilino mėlynojo arba metilo mėlynojo

-500 g / l glicerino

-250 g / l fenolio

-250 ml dejonizuoto arba distiliuoto vandens.

Fenolis ištirpinamas anksčiau pašildytame vandenyje. Pieno rūgštis ir glicerinas pridedami ir labai gerai sumaišomi. Galiausiai mėlynasis anilinas ištirpsta. Jis vėl sumaišomas ir yra paruoštas naudoti.

80 ml laktofenolio mėlynojo tirpalo paruošimo dalys yra:

-20 g fenolio kristalų

-20 ml pieno rūgšties

-40 ml glicerino arba glicerolio

-20 ml distiliuoto vandens.

Naudokite

Jis naudojamas dažyti grybelio struktūras ir, atsižvelgiant į morfologines savybes, stebimas mikroskopiniu lygmeniu, kad būtų galima atlikti spėjamą grybelio diagnozę.

Procesas

Kultūrų grybelinių struktūrų dažymas

- Paimkite gryną grybelio kultūrą, kurios struktūros reikia laikytis.

- Geriausia dirbti su laminarinio srauto gaubtu arba po žiebtuvėliu, naudojant kaukę ir pirštines, nes būtina laikytis biologinio saugumo standartų, nes dauguma pelėsių yra lengvai pasklidę aplinkoje, todėl kelia pavojų operatoriui.

- Ant stiklelio užlašinamas laktofenolio mėlynos spalvos lašas.

- Nupjaukite nedidelį kvadratą geros kokybės lipnios juostos ir labai atsargiai priklijuokite ją prie šaltai sterilizuotos platinos rankenos galo.

- Platinos rankena priartinama prie paviršutiniškiausios grybelių kolonijos dalies, o kultūra labai atsargiai paliečiama ten, kur yra lipni juosta.

- Tada jis nunešamas į stiklelį ir dedamas tiesiai ant laktofenolio mėlynojo lašo, pasirūpinant, kad juostelė būtų nepriekaištingai ištiesta ir sutepta dažais. Platinos rankena labai subtiliai nuimama.

- Ant juostos dedamas kitas laktofenolio mėlynos spalvos lašas, o viršuje - dangtelis. Nespauskite per daug spaudimo, kad nesunaikintumėte grybelio struktūrų, nes jie yra ypač trapūs. Dažikliui turėtų būti leista veikti maždaug 3–4 minutes.

- Pasibaigus šiam laikui, preparatas yra paruoštas stebėjimui per mikroskopą 10x arba 40X padidinimu. Jei reikia 100X stebėjimo, reikia naudoti panardinamąjį aliejų.

- Paprastai grybelio struktūros yra mėlynos spalvos, išskyrus dematiace grybus, kurie išlaikys būdingą rudą šio tipo grybelio spalvą.

Tiesioginis biologinio bandinio dažymas

Jei reikia ištirti tiesioginį biologinį pavyzdį, pvz., Skreplius, pūlį, eksudatus, sekretus, be kita ko, jiems turi būti taikoma ankstesnė mėginio nukenksminimo procedūra. Tam naudojamas NaOH tirpalas.

Jei yra plaukų pavyzdžių, juos galima dažyti tiesiogiai.

Keli pažeisti plaukai (iš viso 10) paimami iš spėjamų kode capito pažeidimų (alopecinių sričių) ir dedami ant stiklelio (nuo 3 iki 4 plaukų kiekvienoje skaidrėje). Keli laktofenolio mėlynos spalvos lašai dedami ant viršaus ir iškart uždengiami dangteliu.

Suimkite stiklelį žnyplėmis ir švelniai kaitinkite virš degiklio. Norėdami tai padaryti, atlikite 3–4 greitus liepsnos srautus. Stebėkite mikroskopą 40X ir ieškokite sporų už plaukų ar jų viduje (atitinkamai ectothrix arba endothrix). Jei reikia, įpilkite panardinimo aliejaus ir stebėkite 100X.

Lytinių ląstelių dažymas nustatant

2–4 valandas 37 ° C temperatūroje inkubuojant tariamą Candida albicans kultūrą žmogaus serume, paimama dalis tirpalo ir dažoma laktofenolio mėlyna spalva. Preparatas stebimas mikroskopu 40X. Yra gemalo vamzdelis, o blastosporos nusidažo ryškiai mėlyna spalva.

Laktophenol saugos duomenų lapas

Nacionalinė priešgaisrinės saugos asociacija (NFPA) sudaro cheminių medžiagų saugos duomenų lapą, atsižvelgiant į riziką, kurią ji atspindi įvairiais aspektais. Juos simbolizuoja spalvotas rombas, o skaičius svyruoja nuo 0- Keturi.

Pavojai sveikatai nustatomi mėlyna spalva, degumas - raudonai, nestabilumas ar reaktyvumas - geltona spalva, o bet koks ypatingas pavojus - balta spalva.

Sveikata

Remiantis NFPA, mėlynos spalvos laktofenolio keliamo pavojaus sveikatai lygis yra 3. Tai reiškia, kad medžiaga yra ypač pavojinga prarijus arba tiesiogiai liečiantis su oda ar gleivine.

Tai labai ėsdinanti ir dirginanti medžiaga.

Patekęs į odą ir gleivinę, sukelia sunkius nudegimus.

Nurijus, tai gali sukelti galvos skausmą, sumišimą, letargiją, sąmonę, kvėpavimo sustojimą ir net mirtį.

Degumas

Remiantis NFPA, „Lactophenol Blue“ degumas yra įvertintas 1 lygiu. Tai reiškia, kad jis dega tik tada, kai yra šildomas virš 94 ° C.

Nestabilumas

Išvardytos pagal NFPA pagal reaktyvumo lygį 0 (nulis). Tai reiškia, kad jis neturi reaktyvumo pavojaus, tai yra, yra chemiškai stabili medžiaga.

Specialūs pavojai

Tai nekelia jokių papildomų ypatingų pavojų.

Nuorodos

1. SAR laboratorija. Lactophenol Blue. 2010. Galima rasti: labsar.com.
2. Taikomosios klinikinės chemijos laboratorija. Lactophenol blue. 2015.Atsiejama: cromakit.es
3. „Merck“ laboratorijos. Lakofenolio mėlynos spalvos mikroskopija tirpale. 2017. Prieinamas adresu: Vartotojai / „Equipo“ / Siuntiniai
4. Avarinė kortelė. Laktophenolio mėlynasis tirpalas, skirtas grybeliui dažyti. Universidad Pontificia Javeriana, Bogota Kolumbija. 2014. Prieinamas adresu: javeriana.edu.co
5. González M, Diamont D, Gutiérrez B. Grybelinių struktūrų dažymo augaliniais dažais technika, kaip neteršianti alternatyva. Bioagro, 2011; 23 (1): 65–68. Galima įsigyti: „Redalyc“.
6. Laboratorinė Himedia. Lakofenolio medvilnės mėlyna. 2017. Galima įsigyti iš: himedialabs.com
7. „Wanger A“, „Chavez V“, „Huang R“, „Wahed A“, „A“ aktorius, „Dasgupta A.“ - Biocheminiai tyrimai ir dažymo metodai mikrobams identifikuoti. „Science Direct“, 2017; 61–73. Galima įsigyti: Elsevier