BENGALIJOS ROŽĖ: PAGRINDIMAS, PROCEDŪRA, KOKYBĖS KONTROLĖ - VAISTAS - 2025

Rose Bengal yra laboratorinis tyrimas, pagrįstas antigeno ir antikūnų reakcija, siekiant diagnozuoti bruceliozę. Šis metodas leidžia nustatyti specifinius antikūnus prieš Brucella abortus bakteriją žmogaus serumo mėginiuose. Rezultatas gali būti pateiktas kokybiškai arba pusiau kiekybiškai.

Kokybinė forma parodo, ar paciento testas teigiamas, ar neigiamas, tai yra, ar nėra antikūnų. Tuo tarpu pusiau kiekybinė ataskaita pateikiama TV / ml ir nurodo apytikslį antikūnų kiekį. Reikėtų pažymėti, kad antikūnai bus gaminami tik tuo atveju, jei pacientas turėjo kontaktą su mikroorganizmu.

Rose Bengal reakcija agliutinacijos plokštelėje. Šaltinis: paimta iš vaizdo įrašo https://youtu.be/igAVQ-GiyGY

Dėl didelio paprastumo, didelio jautrumo ir specifiškumo, tai yra vienas iš seroagliutinacijos metodų, labiausiai naudojamų medicinoje kaip pradinis šios ligos diagnozės testas.

Kai kurie tyrėjai palygino Rose Bengal testo efektyvumą su kitais metodais, tokiais kaip seroagliutinacija (febriliniai antigenai) ir pastebėjo, kad nors ir yra gera koreliacija, jie matė pavienius atvejus, kai febrilinio antigeno testas buvo neigiamas, o Rose de Teigiamas paūmėjimas.

Gautas skirtumas atsirado dėl to, kad šie pacientai turėjo IgG antikūnų prieš Brucella abortus poklasį, turinčius geresnį surišimo pajėgumą esant rūgščiam pH, todėl jie galėjo reaguoti su Rose Bengal reagentu, bet ne su febriliais antigenais.

Šia prasme jie pasiūlė febrilinio antigeno metodo reagentus modifikuoti iki rūgštinio pH, kad jie galėtų aptikti tokio tipo atvejus.

Pagrindas

Rose Bengal reagentą sudaro antigeninė suspensija. Jį sudaro Bruceso abortus S99 padermė, praskiesta rūgšties laktato buferiu (pH 3,6), pridėjus fenolio ir Rose Bengal dažų.

Todėl mėginyje ieškoma antikūnų prieš Brucella, jei tokių yra, jie reaguos su reagento antigenu ir bus stebima makroskopiškai matoma agliutinacijos reakcija. Tyrimas nustato IgM antikūnus arba IgG antikūnus.

Tai reiškia, kad ji gali aptikti ligą tiek ūmioje stadijoje, kur vyrauja IgM antikūnai, tiek lėtinėje stadijoje, kur vyrauja IgG antikūnai.

Tai rodo pranašumą, nes padidina tyrimo jautrumą, tačiau tuo pat metu yra ir trūkumas, nes jis nediskriminuoja vienos ir kitos stadijos, nes reakcija su IgM ir IgG antikūnais yra identiška.

Bandymas visada turi būti atliekamas kartu su neigiama ir teigiama kontrole. Neigiamoje kontrolėje yra gyvūno serumas be antikūnų, o teigiamoje kontrolėje - gyvūninės kilmės serumas, turintis 50 TV / ml anti-Brucella antikūnų.

Naudokite

Bruceliozė yra sunki liga, linkusi būti lėtinė ir pavojinga, todėl labai svarbu, kad ji būtų diagnozuota anksti. Tai zoonozė ir žmonės gali užsikrėsti tiesiogiai kontaktuodami su užkrėsta medžiaga, pažeidžiamiausi žmonės yra veterinarai ir gyvūnų prižiūrėtojai.

Infekcija taip pat gali kilti valgant užkrėstą žalią mėsą, be kitų infekcijos formų.

Ši liga puola lokaliai ar sistemingai. Sisteminė forma yra pati rimčiausia, nes gali būti paveikti įvairūs organai, įskaitant tinklainės endotelio sistemą (kepenis, blužnį, kaulų čiulpus), odą (celiulitą ir limfadenopatiją), kvėpavimo sistemą (pneumoniją), raumenų ir kaulų sistemą (artritą, sacroiliitas ir spondilitas), be kita ko.

Rose Bengal testas yra labai naudinga pradinio patikrinimo metodika, nes ji yra labai nebrangi, lengvai naudojama ir pasižymi dideliu specifiškumu bei jautrumu.

Melagingų neigiamų ir melagingų teigiamų atvejų pasitaiko labai retai ir jie gali atsirasti žmonėms, kurių antikūnų titrai yra labai maži (<25 TV / ml) arba ypač dideli (> 1000 TV / ml).

Procesas

medžiagos

-Rozės Bengalijos rinkinys

-Aglutinacijos plokštelės baltas fonas

-50 µl pipete

-Rotatorius (neprivaloma)

-Vorteksas

Technika (kokybinis metodas)

Komerciniuose rožių bengalų rinkiniuose yra paruoštų naudoti reagentų.

-Pradėkite dirbti reagentais.

-Aglutinavimo plokštelėse yra brėžti apskritimai, kiekviena skirta skirtingam mėginiui. Naudokite 3 apskritimus: pirmasis - neigiamajai kontrolei, antrasis - mėginiui ir trečiasis - teigiamajai kontrolei.

- Įlašinkite lašą arba 50 µl kontrolinės medžiagos ir mėginio į atitinkamą ratą.

-Sumaišykite Rose Bengal reagentą naudodami sūkurį. Padėkite lašą šalia anksčiau pastatytų.

- Sumaišykite su mediniais dantų krapštukais (naudokite po vieną kiekvienam bandiniui ar kontrolei). Padarykite apskrito judesius ir paskleiskite taip, kad apimtų visą ratą.

Šaltinis: vaizdai, paimti iš vaizdo įrašo: https://youtu.be/igAVQ-GiyGY. Redaguotas vaizdo išdėstymas.

- Padėkite plokštelę ant automatinio rotatoriaus, esant 80–100 aps / min arba sukdami rankiniu būdu 4 minutes. Perskaitykite įrodymą šio laiko pabaigoje.

-Patikrinkite, ar kontrolė davė kaip tikėtasi. Palyginkite mėginio reakciją su kontroliniais bandiniais. Nurodoma kaip teigiama, jei pastebima agliutinacija, ir kaip neigiama, jei agliutinacijos nėra.

Teigiamas testas rodo, kad paciento anti-Brucella antikūnų kiekis yra lygus arba didesnis kaip 25 TV / ml.

Teigiamos (su agliutinacija) ir neigiamos (be agliutinacijos) reakcijos aiškinimas. Šaltinis: Citrulinas. Redaguotas vaizdas.

Technika (pusiau kiekybinė)

Jei kokybinėje reakcijoje mėginys yra labai teigiamas, jį galima pusiau įvertinti. Tam daromi nuoseklūs dvigubi mėginio praskiedimai fiziologiniu druskos tirpalu. Anksčiau aprašyta procedūra atliekama su kiekvienu skiedimu.

Tai taip pat aiškinama stebint agliutinaciją makroskopiškai. Rezultatas bus didžiausio skiedimo, kuriame buvo gautas teigiamas rezultatas, titrai.

Apytiksliai antikūnų prieš Brucella vertę apskaičiuoti naudojama ši formulė:

25 TV / ml x reakcijos titras = TV / ml

Pavyzdys, jei pacientas, atlikęs pusiau kiekybinį testą, gauna teigiamą tirpalą ½, ¼ ir 1/8 ir pradeda būti neigiamas nuo 1/16 skiedimo, tai reiškia, kad paciento titras yra 8 .

Taikant formulę:

25 TV / ml x 8 = 200 TV / ml

QA

-Rinkiniai turi galiojimo laiką ir jo turi būti laikomasi. Negalima naudoti, jei reagento galiojimo laikas pasibaigęs.

- Naudojimo metu įsitikinkite, kad reagente nėra kietų dalelių, nes tai yra gedimo požymis.

- Laikykite 2–8 ° C temperatūroje.

-Neužšaldykite, dėl šios priežasties reagentas nepataisomai sugadinamas.

- Visada atlikite testą kartu su neigiama ir teigiama kontrole.

- Metodas toleruoja serumo mėginius, turinčius tam tikrą lipemijos ir hemolizės laipsnį, tačiau nepatartina naudoti per daug lipeminių ir hemolizuotų serumų, abi sąlygos keičia tyrimo rezultatus.

- Prieš pradėdami analizę, reagentus visada palaikykite kambario temperatūroje.

- Neaiškinkite reakcijų, kurios užtrunka ilgiau nei rekomenduojamas laikas, nes tai sukuria klaidingų teigiamų rezultatų ataskaitą, nes po tam tikro laiko reagentas nusėda, imituodamas teigiamą reakciją.

-Technika yra 100% jautri ir 98% specifiškumas.

- Po pusiau kiekybinio 1000 TV / ml kiekio nustatymo yra galimybė pastebėti prozono poveikį (klaidingai neigiamas dėl antikūnų pertekliaus, palyginti su antigenų kiekiu).

Nuorodos

1. Rubio M, Barrio B ir Díaz R. „Rosa de Bengala“, „Coombs“ ir antimunoelektroforezės testų vertė diagnozuojant žmogaus bruceliozės atvejus, kai serumo agliutinacija yra neigiama. Mikrobiologijos katedra. Klinikinės mikrobiologijos tarnyba. Universiteto klinika. Navaros universitetas. 406–407. Galima rasti svetainėje elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas
2. "Bruceliozė". Vikipedija, nemokama enciklopedija. 2019 m. Gruodžio 6 d., 14:37 UTC. 2019 m. Gruodžio 18 d., 18:09 en.wikipedia.org.
3. „Monlab“ laboratorijos. „Monlab Bengal Rose“ - testas. 2016.Atsiejama: monlab.es/
4. Carrillo C, Gotuzzo E. Bruceliozė. Peru atšventimas. Med. Visuomenės sveikata 1997; 14 (1): 63–66. Galima rasti: scielo.org
5. „Morales-García R“, „García-Méndez N“, „Regalado-Jacobo D“, „López-Merino A“, „Contreras-Rodríguez A.“ Brucelioze sergančios šeimos klinikinės, serologinės ir polimerazės grandininės reakcijos stebėjimas. Chil. Infektolis. 2014; 31 (4): 425-433. Galima rasti svetainėje: scielo.conicyt.